📜羊毛甾醇置于paracoccidiodes Brasiliensis Sterol C24-Methyltransferase,Recombinant,Adomet体系中,用55%的收率获得产物齿孔醇
参考文献:芸苔甾醇生物合成中涉及的真菌固醇c24-甲基转移酶的克隆,机理和功能分析.
标题:芸苔甾醇生物合成中涉及的真菌固醇c24-甲基转移酶的克隆,机理和功能分析.
摘要:已证明,在非包膜真菌巴西副球菌(paracoccidiodes Brasiliensis)(pb)中形成24-烷基甾醇的第一步涉及到羊毛脂的c24甲基化为eburicol(24(28)-亚甲基-24,25-二氢羊毛甾醇).代谢产物共存的基础.采用基于相似性的克隆策略来获得与c24-甲基化反应有关的固醇c24-甲基转移酶(smt)对应的cdna克隆.制备为重组融合蛋白(his / Trx / S)的所得催化剂在大肠杆菌bl21(c43)中表达,显示对羊毛甾醇具有底物特异性,并反应生成单一的环外亚甲基产物.全长cdna具有1131个碱基对的开放阅读框,编码377个残基的蛋白质,计算的分子量为42,502Da.酶促c24甲基化的k(mapp)为38Microm,K(catapp)为0.14Min(-1).出乎意料的是,"植物"环戊烯醇以高收率被催化反应生成24(28)-亚甲基环烷醇,这与构象论点相符,有
DOI:10.1016/j.Bbalip.2010.06.007