以木糖基硫脲为目标化合物的骨架,设计合成了一类新型的木糖基氨基硫脲腺嘌呤,木糖基氨基硫脲苯并咪唑,木糖基氨基硫脲甲氧基苯甲酰氨苯并咪唑.合成路线包括六步反应,主要原料为全乙酸酯化的木糖,溴水,硫氰酸铅,杂环碱基,氯乙酸乙酯和水合肼.
第一步反应是1-溴-2,3,4-三-O-乙酰基-α-D-木糖的合成.在250mL三口瓶中加入红磷和冰醋酸,用滴液漏斗加入溴水,过滤弃去红磷后加入全乙酰化的D-木糖,反应直到薄层层析检测反应物全乙酰化的D-木糖全部消失.
第二步反应是2,3,4-三-O-乙酰基-α-D-木糖基异硫氰酸酯的合成.硫氰酸铅和无水二甲苯加入三口瓶中,加热回流后用滴液漏斗加入1-溴-2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-木糖的无水二甲苯溶液,反应液回流反应,过滤弃去剩余的硫氰酸铅,减压除去溶剂,残渣用等比例的甲苯和石油醚混合溶剂重结晶.
采用MTT法,测定木糖基硫脲杂环化合物在体外对人类肺癌细胞株(PG)和人类肝癌细胞株(BEL-7402)的抑制作用.抗肿瘤活性研究中,人类肺癌细胞株(PG)和人类肝癌细胞(BEL-7402)为目标细胞,细胞培养基为含有10%BCS的1640培养基,对数生长期细胞用胰酶消化后,调节细胞密度为3~5×103个/孔,接种在96孔培养板中,每孔100μl,放入温度为37℃,CO2含量为0.5%的培养箱中培养24小时.
将配制好的不同浓度的样品加入96孔培养板中,不同稀释浓度的阳性对照药齐多夫定(ZIdovudIne,AZT)药液为阳性对照,放入温度为37℃,CO2含量为0.5%的培养箱中继续培养48小时.取出96孔培养板,每孔加入20μl的5mg/mL的MTT,继续培养4小时.取出培养板,倒出培养基,每孔加入150μlDMSO,37℃振荡6分钟,490nm处测定各孔的光密度值.计算抑制率:(OD阴性对照-OD样品)/OD阴性对照×100%.