为了解决高通量筛选的局限性,基因编码化合物库技术(DELT)应运而生.DELT通过将特定基因序列与小分子化合物结合,利用组合化学策略快速合成大量化合物,并通过与靶标蛋白的孵育筛选出高亲和力的化合物.这种技术不仅降低了筛选成本,还极大地提升了化合物库的多样性和筛选效率.
在DELT技术中,On-DNA化学反应是其核心之一.目前,已有多种On-DNA化学反应被报道,例如SuzukI偶联反应和芳基苄位取代反应.然而,现有的化学反应种类仍不够丰富,尤其是针对脒基脲类化合物的合成方法仍未开发.由于DNA对反应条件高度敏感,开发一种对DNA损伤小,收率高的On-DNA脒基脲合成方法具有重要意义.
本文提出了一种在DNA上合成脒基脲类化合物的新方法.该方法以寡聚核酸-胍化合物和异氰酸酯为原料,在四硼酸钠缓冲液中反应,生成寡聚核酸-脒基脲类化合物.反应过程对DNA的损伤小,产物收率高,且DNA完整性良好,适合用于基因编码化合物库的构建.
具体反应步骤如下:首先,寡聚核酸-胍化合物与异氰酸酯在有机溶剂中反应,生成中间产物;随后,通过四硼酸钠缓冲液的调节,最终获得目标化合物.该方法普适性好,适用于多种异氰酸酯底物,且反应条件温和,操作简单.