本研究的合成路线主要分为两种:
反应路线1:首先将胆酸类成分溶解于有机溶剂中,与2-溴代甲基-3,5,6-三甲基吡嗪(中间体化合物1)在碱性条件下反应,得到化合物I.接着,化合物I在催化剂和缩合剂的作用下与川芎嗪酸(中间体化合物2)反应,得到最终的化合物II.
反应路线2:将胆酸类成分与苄溴在碱性条件下反应,生成中间体化合物3.随后,中间体化合物3与川芎嗪酸反应,得到化合物III.最后,通过氢气还原,得到化合物IV.
这些化合物的合成条件涉及多种有机溶剂,如苯,四氯化碳,二氯甲烷等,反应温度范围从-20℃到250℃.采用的碱包括三乙胺和碳酸钾,催化剂则为1-羟基苯并三唑(HOBT),缩合剂则使用了1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDCI)和4-二甲氨基吡啶(DMAP).
为评估这些化合物的抗癌活性,本研究针对多种癌细胞系(如HepG-2,HT-29,Hela,MCF-7等)和正常细胞系(如NGF诱导PC12细胞,肾上皮细胞MDCK,小鼠胚胎成纤维细胞3T3)进行了细胞毒活性测试.通过AlamarBlue法,测试了这些化合物对癌细胞增殖的抑制作用.
实验结果表明,合成化合物对多种癌细胞具有显著的抑制作用,尤其对肝癌,结肠癌和宫颈癌的细胞毒活性表现突出.其中,化合物10对人结肠癌细胞系HT-29和人宫颈癌细胞系Hela的抗增殖活性优于阳性药物阿霉素.与此同时,这些化合物对正常细胞的毒性较低,表明其具有良好的选择性.