目前,以植物甾醇为底物生产黄体酮中间体21-羟基-20-甲基孕甾-4-烯-3-酮的技术在国际及国内都是空缺的.本文以生产豆油的下脚料植物甾醇为底料,利用发酵生产.
(1)一级培养:将2‑6mL的分枝杆菌接种到含有200mL培养液的摇瓶中,在30‑35摄氏度的摇床上震荡培养40‑56小时,得摇瓶种子液;
(2)二级培养:将200‑1000mL摇瓶种子液接种到含有400L培养液的一级种子罐中,通无菌空气,100‑200rpm下搅拌及在30‑35摄氏度下培养36‑48小时,得一级种子罐种子液;
(3)三级培养:将300‑500L一级种子罐种子液加入到含有5‑8m3培养液的二级种子罐中,通无菌空气,100‑200rpm下搅拌及在30‑35摄氏度下培养2‑3天,即得21-羟基-20-甲基孕甾-4-烯-3-酮.
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