达泊西汀中间体的生物合成方法主要由化合物(2)和化合物(3)作为起始原料,经过相转移催化取代反应制得化合物(4),再通过生物酶转化反应最终生成达泊西汀中间体化合物(1).以下是具体技术方案:
相转移催化取代反应:化合物(2)与化合物(3)的摩尔比为1:1~1.2,反应温度为0~50℃,反应溶剂可选四氢呋喃,乙醚,甲基叔丁基醚,二氯甲烷,甲苯,叔丁基醚,水和2-甲基四氢呋喃中的一种或几种.催化剂为苄基三乙基氯化铵,四丁基溴化铵等,化合物(2)与催化剂的摩尔比为200:1~20.
生物酶转化反应:化合物(4)使用生物酶ABJ05767或其定向突变体进行转化,优选的突变体为S152E,L161V,A194S和A201N.反应溶剂包括水/二甲基亚枫,水/甲醇,水/乙醇,水/异丙醇,水/丙酮等,化合物(4)在反应溶剂中的质量浓度为2-150g/L.反应中加入氨源如异丙胺,三乙胺,丙胺,乙胺和丁胺,浓度为0.25-1.25M.
与现有技术相比,这种合成方法具有显著的优势:
合成路线新颖:采用相转移催化取代和生物酶转化反应,简化了工艺流程,降低了生产成本.
原料廉价易得:起始原料化合物(2)和化合物(3)在市场上易于获取,降低了原料成本.
合成产率高:通过优化反应条件,摩尔收率达到97%以上,HPLC检测纯度高达99.81%.
适合工业化生产:该方法操作简单,反应条件温和,适合大规模工业化生产.