经紫外线与γ射线复合诱变获得的米曲霉WZ007菌株(保藏编号CCTCCM206105),其产生的新型内酯合成酶展现三大特性:
1.立体选择性极强:在甲苯溶剂中对底物外消旋有机酸的转化率达32-50%,产物e.e值稳定在95-98%
2.操作窗口宽泛:适应温度30-50℃,底物浓度1-30%,酶反复使用5次仍保持90%以上活性
3.工业化适配性高:菌株在含葡萄糖/蛋白胨的廉价培养基中,48小时即可产出10.1U/g的高活性酶粉
通过对比实验发现:
溶剂筛选:甲苯体系转化率(32.6%)显著高于二氯甲烷(32%),氯仿(30%)等溶剂,且e.e值提升3-6个百分点
温度控制:40℃反应24小时可实现48.9%转化率,较30℃反应效率提升21%
底物浓度:2%浓度下收率最高,当提升至5%时需相应增加酶用量至25U/g底物
后处理工艺:甲苯相经0.1MPa减压蒸馏后,常温结晶可获得纯度＞99%的白色晶体