西他列汀是一种治疗Ⅱ型糖尿病的药物,其合成的关键在于手性胺中心的构建.利用转氨酶催化不对称转氨反应,可以高效地合成手性胺中间体.传统的游离酶催化存在分离困难,无法重复利用的问题,而固定化转氨酶则解决了这一难题.
以3-羰基-4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酸甲酯为底物,通过固定化转氨酶催化不对称转氨反应,可以高效合成R-3-氨基-4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酸甲酯.这一反应条件温和,转化率高,且固定化酶可以重复利用20批次以上,极大地降低了生产成本.
固定化转氨酶的合成路线包括载体制备,酶固定化和反应条件优化三个步骤.首先,将环氧树脂用亚氨基二乙酸(IDA)和氯化钴衍生化,制成酶固定化载体.然后,利用带组氨酸标签的转氨酶与载体结合,并通过双氧水处理提高结合能力.最后,在磷酸-磷酸钠缓冲溶液中,加入异丙胺和磷酸吡哆醛(PLP),进行不对称转氨反应.
原料主要包括环氧树脂,亚氨基二乙酸(IDA),氯化钴,转氨酶基因质粒,异丙胺和磷酸吡哆醛(PLP)等.这些原料均易于获得,且反应条件温和,适合工业化生产.