A3人T淋巴细胞白血病细胞来自Jurkat细胞系,是用Fas抗体处理Jurkat细胞,随后有限稀释法获得一个细胞系.A3细胞系对Fas介导的凋亡产生自发抗性的比例较低,得到的亚克隆对Fas-介导的凋亡十分敏感.挑选对新霉素具有抗性的野生型A3细胞,并三次用移码突变诱变剂ICR-191进行处理以分离具有抗Fas抗体杀伤的隐性突变体.
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A3人T淋巴细胞白血病细胞可以用于影响颅脑创伤患者凝血功能疗法的基础与临床研究
究采用候选策略,利用成人中重型颅脑创伤(moderate to severe traumatic brain injury)患者的外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC),通过流式细胞术,Real-time q PCR技术验证七个lnc RNA(lnc RNA4916,lnc RNA7406-2,lnc RNA1403,lnc RNA2448-11,lnc RNA7411-2,lnc RNA4551-1,lnc RNA5189-2)是否参与HS治疗TBI前后单核细胞表型的变化及相关细胞因子表达的变化,筛选出与HS的免疫调节功能相关的lnc RNA.方
法:中重型颅脑创伤患者34例进行前瞻性研究.入选患者采用随机数字表法随机分为两组:7.5%HS治疗组(A组),3%HS治疗组(B组).两组患者采取一致的纳入和排除标准,进入相应的研究组后给予除不同浓度的HS之外相同的治疗方案,采用组间相互对照及组内治疗前后自身对照,观察其颅内压下降的情况,凝血纤溶指标的改变以及预后情况.在患者治疗前,治疗后6h及24h后从静脉分别采集血液样本,淋巴细胞分离液分离患者外周血单个核细胞,流式细胞术检测单核细胞表型偏移.体外培养人单核细胞系(THP-1),人B淋巴细胞系(Raji)及A3人T淋巴细胞白血病细胞,检测lnc RNAs(lnc RNA4916,lnc RNA1403,lnc RNA2448-11,lnc RNA7411-2,lnc RNA4551-1,lnc RNA5189-2)的表达谱,筛选出只在单核细胞表达或单核细胞优势表达的候选lnc RNAs.RT-q PCR检测患者外周血单个核细胞候选lnc RNAs及受其调控的编码基因(TNF-α,IL-6,IL-1β,TGF-β,TM)的表达.
结果:7.5%HS治疗可有效降低中重型颅脑创伤患者的颅内压,同时并不会破坏患者凝血功能的平衡.对经7.5%HS与3%HS治疗的中重型颅脑创伤患者外周血单核细胞的流式细胞分析显示,7.5%HS可明显抑制中重型颅脑创伤患者CD14++CD16+促炎亚型单核细胞的增加.RT-q PCR检测结果显示7.5%高渗盐水可抑制中重型颅脑创伤患者外周血单核细胞lnc RNA2448-11和lnc RNA1403的表达并影响其靶基因的转录.
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