Anti-GAPDH抗体
Anti-GAPDH抗体是以ANTI-GAPDH为抗原制得的免疫抗体,可以特异性结合GAPDH.主要用于检测GAPDH的Western Blot,IHC-P,IF,ELISA,Co-IP等多种免疫学实验. 甘油酸-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)是生物体内一类十分保守的重要多功能酶类,广泛存在于原核及真核生物体内,如大肠杆菌,酵母,秀丽线虫,大鼠和小鼠等模式生物,主要参与生物体内糖代谢中糖酵解的第六步反应,即催化甘油醛-3-磷酸转化为1,3-二磷酸甘油酸并释放出能量(ATP)的过程.
📌 参考资料/链接：
The neurodegeneration in Alzheimer disease and the prion protein[J].Gianluigi Forloni,Alessandra Sclip,Tiziana Borsello,Claudia Balducci.Prion.2013(1)
📄 详细内容
用于GAPDH作为原核及真核生物通用型内标蛋白的研究及相关生物技术研发研究
利用鼠源GAPDH单克隆抗体分别检测了正常条件下大肠杆菌(包括BL21(DE3),HB101,DH5a禾口OP50四个株系),酵母菌GS115,秀丽线虫,PC12细胞,小鼠脑组织和大鼠脑组织中GAPDH蛋白的表达情况,进而分别检测了大肠杆菌BL21(DE3),酵母菌GS115,秀丽线虫和PC12细胞在不同应激条件下GAPDH蛋白的表达变化.
结果发现,鼠源GAPDH单克隆抗体可广泛地识别不同物种GAPDH蛋白,且不同物种GAPDH的含量及,原核生物中GAPDH,不同物种GAPDH可相对稳定地表达在不同的外界应激条件下,如大肠杆菌GAPDH的表达不随诱导剂IPTG浓度的增加而改变,也不随诱导表达时间的增加而变化;酵母菌GS115中GAPDH的表达不随诱导剂甲醇浓度的增加而改变,也不随诱导表达时间的增加而变化;秀丽线虫中GAPDH的表达不随百草枯(Paraquat,PQ)处理浓度的增加而变化;PC12细胞中GAPDH的表达不随亚硫酸钠(Sodium sulfite,SS)处理浓度的增加而改变.
上述结果说明GAPDH可广泛且稳定地表达于原核及真核生物,可用于原核及真核生物蛋白表达相对定量的内标蛋白.进一步地,为了明确鼠源GAPDH单克隆抗体能识别原核生物GAPDH变体类型,采用免疫共沉淀技术获得大肠杆菌HB101与鼠源GAPDH单克隆抗体相互作用的蛋白,进而利用MALDI-TOF-MS质谱鉴定及Mascot多肽指纹图谱分析比对.
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