CX-1人大肠癌贴壁细胞系

CX-1人大肠癌贴壁细胞系可以用于益气健脾抗癌法对肠癌脾虚本质的影响及抗肿瘤作用实验研究
研究益气健脾抗癌法对肠癌脾虚本质的影响及抗肿瘤的机理,分析肠癌辨证论治规律;进一步证明中医益气健脾抗癌法的治疗作用,深入研究益气健脾和抗癌之间的内在关系,在细胞水平,分子水平,蛋白质水平层面深入揭示益气健脾抗癌法的作用机理,本实验具有较为重要的临床意义.
材料与方法:1.CX-1人大肠癌贴壁细胞系细胞株体外培养:CX-1人大肠癌贴壁细胞系细胞株常规培养于含10%小牛血清的RPMI1640培养基之中,在37℃,5%二氧化碳100%饱和湿度的培养箱中传代培养,次日观察细胞成活情况.肠癌细胞株HT29为贴壁生长细胞,细胞24小时即进入对数生长期,取对数生长期以上的贴壁细胞,消化后以新鲜培养液配制成1×104个/毫升,96孔板各孔加100µL,置37℃,5%二氧化碳100%饱和湿度的培养箱中培养.24小时后改为成无血清的培养基加受试血清,受试血清加入各孔内(10µL/孔),同一浓度的设3孔,对照孔中加10µL正常血清,调零孔中加100µL培养液.继续培养72小时后,每孔加100µL的5mg/mL的MTT溶液,置于培养箱内4小时后,每孔加100µL溶解液,培养箱内过夜,用全自动酶标仪测570nm处记OD值.取对数生长期的HT29细胞,调整成细胞浓度为5.0×104个细胞/毫升的悬浮液.
2.CX-1人大肠癌贴壁细胞系细胞移植瘤鼠建模:选择对数生长期肿瘤细胞,细胞浓度调至1×107/ml,裸鼠右腋下碘伏消毒,使用1ml注射器在裸鼠右腋下接种肿瘤细胞液0.2ml/只鼠,整个操作过程均要求无菌操作,每天观察肿瘤的生长情况.接种15天后,以在接种部位出现肿瘤结节直径达0.8cm,质地较硬等指标认定为成瘤.
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