ANTI-HISTONE H3 (PHOSPHO T118)抗体
ANTI-HISTONE H3(PHOSPHO T118)抗体是一类可以特异性结合HISTONE H3(PHOSPHO T118)的多克隆抗体,主要用于检测HISTONE H3(PHOSPHO T118)的Western Blot,IHC-P,IF,ELISA,Co-IP等多种免疫学实验. 检测原理:双抗体夹心法测定标本中HISTONE H3(PHOSPHO T118)水平.用纯化的HISTONE H3(PHOSPHO T118)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入HISTONE H3(PHOSPHO T118),再与HRP标记的HISTONE H3(PHOSPHO T118)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色.TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色.颜色的深浅和样品中的HISTONE H3(PHOSPHO T118)呈正相关.用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中HISTONE H3(PHOSPHO T118)浓度.
📌 参考资料/链接：
RAS oncogenic signal upregulates EZH2 in pancreatic cancer[J].Satoshi Fujii,Katsumi Fukamachi,Hiroyuki Tsuda,Kosei Ito,Yoshiaki Ito,Atsushi ℃hiai.Bi℃hemical and Biophysical Research Communications.2011(3)
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用于PI3K/AKT和MEK/ERK通路调控H3K27me3甲基化酶和去甲基化酶基因表达的研究
用小鼠成肌细胞C2C12为研究材料,采用免疫印迹,染色质免疫共沉淀(Chromatinimmunoprecipitation,CHIP),定量PCR(Q-PCR)的方法研究PI3K/AKT信号通路在成肌细胞分化阶段对组蛋白H3K27甲基化酶EZH1/EZH2和去甲基化酶UTX/JMJD3的表达调控.此外,在多种肿瘤组织中检测到EZH2存在过表达的现象,UTX和JMJD3也被检测到发生突变或者表达下降.MEK/ERK信号通路是生物体内广泛存在的一条信号通路,参与调控细胞的生长,增殖,分化和凋亡等生命过程.
在某些癌症细胞中,MER/ERK信号通路参与调控EZH2基因的表达.为了进一步研究这条通路对组蛋白甲基化酶和去甲基化酶的调控.我们以C2C12,C127,NIH3T3,HEPA1-61-6,RD五种细胞系为研究对象,用RT-PCR和Western-Bloting方法分析检测MER-ERK信号通路对组蛋白H3K27甲基化酶EZH2/EZH1基因和去甲基化酶UTX/JMJD3基因的表达.
结果...磷酸化的AKT在成肌细胞分化过程中逐渐升高,EZH1和JMJD3蛋白表达变化不明显,EZH2蛋白表达降低,到第6和第7d蛋白降到最低值,UTX蛋白表达升高.
成肌细胞分化过程中用PI3K/AkT信号通路激活剂处理24h后,Myogenin和MCK蛋白表达升高,H3K27me3在Myogenin基因启动子区和MCK基因启动子及增强子区的富集与对照组相比降低.
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