2-二醇脱氢酶抗体

用于非小细胞肺癌血清分泌蛋白标志物筛选研究
非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)是临床上最为常见的恶性肿瘤之一,寻找有效的肺癌诊断标志物一直是国内外研究的重要课题.癌细胞在发生,生长中可以分泌某些蛋白质进入血液,理论上讲,血清中肺癌细胞分泌蛋白可能伴随肺癌的发生而出现;且其血清浓度可能与肺癌细胞的异常增殖和／或其在癌细胞中的异常表达量密切相关.因此,肺癌细胞分泌蛋白是潜在的肺癌血清标志物,且对肺癌的早期筛选可能具有重要意义.
分泌蛋白二氢二醇脱氢酶(DDH)的Western blot验证以往的研究发现二氢二醇脱氢酶(DDH)是胞浆蛋白,且在肺癌组中有较高的表达,因此本研究选择DDH做进一步检测.A549细胞培养液上清蛋白及对照蛋白样品按分子克隆试验指南的方法进行:每孔上样量为50µg,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分离及转膜,蛋白转移至PVDF上,封闭,一抗(抗DDH抗体)孵育,洗涤,二抗温育,PBS洗涤,最后用ECL试剂发光及显影.对肺癌细胞分泌蛋白进行了研究,鉴定出A549细胞的分泌蛋白包括:α肌动蛋白,γ肌动蛋白,α烯醇酶(EN01),锰—超氧化物歧化酶(MnSOD),谷胱苷肽S转移酶P(GSTP1-1),二氢二醇脱氢酶(DDH),磷酸甘油酸变位酶(PGAM1),葡萄糖依赖性胰岛素释放肽受体(GIPR),肽基脯氨基顺反异构酶(PPIA),磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP),蛋白基因产物9.5(PGP9.5),Peroxiredoxin 1(PDX1),Galectin-1等.
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