C-ABL抗体是一种IgG1κ小鼠单克隆c-Abl抗体(也称为ABL1抗体,ABL原癌基因1抗体或非受体酪氨酸激酶抗体),可通过WB,IP,IF,IHC(P)和ELISA检测小鼠,大鼠和人类的c-Abl蛋白.c-Abl抗体(8E9)既可以作为非共轭抗c-Abl抗体,也可以作为多种共轭形式的抗c-Abl抗体,包括琼脂糖,HRP,PE,FITC和多种共轭物.Abl癌基因最初被鉴定为Abelson小鼠白血病病毒(A-MuLV)的病毒转化基因.c-Abl的主要翻译产物已被鉴定为具有酪氨酸激酶活性和SH2结构域的蛋白质.Abl癌基因与几种人类白血病有关,包括90-95%的慢性髓细胞白血病(CML),20-25%的成人急性淋巴细胞白血病(ALL)和2-5%的儿童ALL.在这些白血病中,c-Abl原癌基因经历(9;22)染色体易位,产生费城(Ph1)染色体.这种易位的分子结果是产生编码活化的Abl蛋白酪氨酸激酶的嵌合Bcr/c-Abl mRNA.已证明Bcr基因编码一种针对Ras相关GTP结合蛋白p21rac的GTP酶激活蛋白(GAP).
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C-ABL抗体可以用于c-Abl在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其恶性行为作用机制的初步探讨
c-Abl在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其临床意义目的检测在不同E℃标本中c-Abl蛋白表达情况,探讨c-Abl的表达与E℃患者临床病理特征之间的关联性.
方法:(1)采用C-ABL抗体免疫组织化学测定22例正常卵巢组织,28例良性卵巢肿瘤组织,18例交界性卵巢肿瘤组织及137例E℃组织标本中c-Abl的表达情况,分析c-Abl的异常表达与其临床病理特征的相关性.(2)采用C-ABL抗体Western blot测定18例正常卵巢组织标本,17例卵巢良性肿瘤组织标本,14例卵巢交界性肿瘤组织标本和32例E℃组织标本中c-Abl的表达情况,分析c-Abl的异常表达与其临床病理特征的相关性.(3)应用Kaplan-Meier生存分析比较不同E℃组织标本中c-Abl表达强弱对患者生存时间的影响;Cox回归分析研究关于E℃患者生存时间的相关影响因素.(4)采用C-ABL抗体Western blot检测不同人卵巢癌细胞株(SKOV3,3AO,OVCAR-3,ES-2)中c-Abl蛋白表达情况,应用激光共聚焦显微镜技术探究c-Abl在人卵巢癌细胞株中的亚细胞定位.
C-ABL抗体结果:(1)免疫组化结果显示,在137例E℃组织标本中,c-Abl呈强阳性表达有94例(68.6%),低表达或不表达者有43例(31.4%);在正常卵巢组织21例(95.5%),卵巢良性肿瘤24例(85.7%)及卵巢交界性肿瘤14例(77.8%)呈c-Abl不表达,差异有显著统计意义(P<0.05).在E℃中,FIGO分期中III-IV期的c-Abl蛋白表达水平显著高于I-II期组织(P<0.001),c-Abl表达水平在病理分化程度为中低分化显著高于高分化者(P<0.001),c-Abl表达水平在E℃患者血浆Ca-125≥35U/ml的显著高于Ca-125<35U/ml(P=0.019),c-Abl表达在术后残余肿瘤直径≥1cm的E℃患者显著高于术后残余肿瘤直径<1cm者(P=0.015),但与E℃患者腹水情况,病灶单双侧,年龄,肿瘤大小及病理学类型无关(P>0.05).(2)C-ABL抗体Western blot结果显示,E℃组织标本中c-Abl的表达显著高于正常卵巢组织,卵巢良性肿瘤组织及卵巢交界性肿瘤组织(分别为:1.704±0.382,0.317±0.062,0.334±0.066,0.346±0.068),差异有显著统计学意义(P<0.05).在E℃组织中,c-Abl蛋白表达水平与E℃组织分化程度,术后残余肿瘤直径大小,患者血浆Ca-125水平,FIGO肿瘤分期有关(P<0.05),而与E℃患者腹水情况,病灶单双侧,年龄,肿瘤大小及病理学类型无关(P>0.05).(3)Kaplan-Meier生存分析显示,c-Abl高表达的E℃患者生存时间显著短于c-Abl低表达的患者(P<0.05),多变量分析表明不满意的肿瘤细胞减灭术,c-Abl高表达和FIGO分期中晚期可能是E℃预后的独立因素.(4)c-Abl在SKOV3,3AO,ES-2,OVCAR-3中的表达分别为:1.044±0.138,0.905±0.096,0.943±0.170,0.855±0.750;通过激光共聚焦显微镜观察到c-Abl与肌动蛋白共表达于细胞膜和细胞质上.
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