Anti-Ubiquitin抗体
Anti-Ubiquitin抗体是一类可以特异性结合Anti-Ubiquitin的多克隆抗体,主要用于检测Anti-Ubiquitin的Western Blot,IHC-P,IF,ELISA,Co-IP等多种免疫学实验. 检测原理:双抗体夹心法测定标本中Anti-Ubiquitin水平.用纯化的Anti-Ubiquitin抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Anti-Ubiquitin,再与HRP标记的Anti-Ubiquitin抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色.TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色.颜色的深浅和样品中的Anti-Ubiquitin呈正相关.用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中Anti-Ubiquitin浓度.
📌 参考资料/链接：
Oncogenic breakdowns in end℃ytic adaptor proteins[J].Nicola Crosetto,Ritva Tikkanen,Ivan Dikic.FEBS Letters.2005(15)
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用于Ubiquitin和p53在胆道系统肿瘤中的表达和意义研究
泛素蛋白和p53在胆道肿瘤与胆道炎性组织的表达差异,试图找到胆道系统肿瘤发生机制,以提供一定的研究基础.
方法:1收集临床标本,标本固定在4%多聚甲醛与PBS的溶液中,4℃,持续24小时,采用免疫组织化学法检测人胆道肿瘤组织,正常胆道组织以及炎性组织中泛素蛋白的表达及其表达水平,分析人胆道肿瘤组织中泛素蛋白的表达情况与不同临床病理情况之间的相关性.
2胆囊癌,胆管癌,结石性胆囊炎胆囊组织收集同方法1,组织块用RIPA裂解液(50mmol·L-1 Tris(PH8.0),150mmol·L-1 NaCl,1mmol·L-1 EDTA,1%NP-40,0.1%SDS),在裂解液中加入蛋白酶抑制剂,按1:100加入.得到总蛋白后,用蛋白电泳检测蛋白中泛素蛋白和p53的表达情况.
3用半定量PCR技术,我们检测胆道肿瘤组织以及相应癌旁组织中泛素mRNA水平.当然,我们首先检测胆管癌细胞系QBC-939的泛素mRNA情况.
结果:1人胆道肿瘤组织中泛素蛋白的表达显著高于正常组织以及炎性组织中泛素蛋白的表达(p<0.05).泛素蛋白的表达与病理组织学分级有明显关系(p<0.05).
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