D341Med (人髓母细胞瘤细胞)
D341Med(人髓母细胞瘤细胞)是一种来源于人髓母细胞瘤的细胞系.髓母细胞瘤是一种恶性脑肿瘤,主要发生在儿童和青少年时期.D341Med细胞系由Friedman等人于1988年从一名患有髓母细胞瘤的男孩身上提取的肿瘤组织中建立. D341Med(人髓母细胞瘤细胞)具有超二倍体的特性,模态数为49,范围在44至50之间.这些细胞中存在四条标记染色体,包括11HSR,i(17q),der(22)t(1;22)(q12;p12)和8q-.这些染色体的异常可能与髓母细胞瘤的发生和发展有关. 在细胞培养方面,D341Med(人髓母细胞瘤细胞)通常需要特定的培养基和条件来维持其生长和活性.一般来说,这些细胞可以在MEM(ATCC改良)培养基中生长,其中添加有10%的胎牛血清(FBS),1mM的Sodium Pyruvate和1%的P/S(青霉素/链霉素).此外,细胞培养的环境也需要保持适当的温度,湿度和二氧化碳浓度. D341Med(人髓母细胞瘤细胞)具有多种应用价值.首先,它可以作为研究髓母细胞瘤发病机制和治疗的理想模型.通过深入研究这些细胞的生物学特性,科学家们可以更好地理解髓母细胞瘤的生长,分化和转移过程,从而为开发新的治疗方法提供线索.其次,D341Med(人髓母细胞瘤细胞)还可以用于药物筛选实验,以评估不同药物对髓母细胞瘤细胞的疗效.此外,这些细胞还可以用于基因表达分析,信号通路研究等方面.
📌 参考资料/链接：
Next-generation cancer organoids.[J].LeSavage Bauer L;Suhar Riley A;Broguiere Nicolas;Lutolf Matthias P;Heilshorn Sarah C.Nature materials,2021
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D341Med(人髓母细胞瘤细胞)可以用于靶向PBK对髓母细胞瘤细胞增殖及凋亡影响的机制研究
探究关键基因PBK在髓母细胞瘤发生发展中的作用以及PBK作为D341Med(人髓母细胞瘤细胞)瘤治疗靶点的潜力.研究方法通过生物信息学分析验证课题组前期筛选的髓母细胞瘤预后关键基因PBK在不同亚型中的异常表达以及其对各髓母细胞瘤预后的影响.
体外实验采用RT-qPCR和Western blot实验检测靶基因PBK在D341Med(人髓母细胞瘤细胞)细胞系中的基础表达.通过EdU增殖实验,Cell Counting Kit-8(CCK-8)增殖实验检测PBK靶向抑制剂HI-TOPK032对髓母细胞瘤细胞系增殖的影响.通过Annexin V-APC/7-AAD双染细胞凋亡试剂盒检测PBK靶向抑制剂HI-TOPK032对D341Med(人髓母细胞瘤细胞)细胞系凋亡的影响.通过Western Blot实验探究PBK抑制剂HI-TOPK032抑制髓母细胞瘤细胞增殖与诱导细胞凋亡的下游机制.
采用PBK敲减慢病毒构建稳转Daoy与D341Med(人髓母细胞瘤细胞)细胞株,qPCR与Western blot实验验证转染效率.通过上述体外功能实验验证PBK敲减后的Daoy与D341细胞增殖能力以及凋亡水平的变化.体内实验通过立体定位仪与微量注射器建立人髓母细胞瘤原位模型,采用小动物活体光学成像系统检测原位移植瘤小鼠模型的髓母细胞瘤生长情况.研究结果生物信息学分析结果表明PBK的高表达与非WNT亚型D341Med(人髓母细胞瘤细胞)较差的预后显著相关.EdU增殖实验,Cell counting kit-8(CCK-8)增殖实验证明靶向PBK能够抑制髓母细胞瘤细胞的增殖.
Annexin V-APC/7-AAD双染细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡,结果表明靶向PBK能诱导髓母细胞瘤细胞的凋亡.Western blot实验结果提示用PBK抑制剂HI-TOPK-032靶向PBK会导致PBK下游信号分子ER1/2和AKT的磷酸化水平降低以及Cleaved-caspase3的激活,从而抑制Daoy,D341Med(人髓母细胞瘤细胞)的增殖以及诱导肿瘤细胞的凋亡.EDU增殖实验与CCK-8增殖实验结果表明敲减PBK后Daoy与D341Med(人髓母细胞瘤细胞)增殖能力变化无显著性差异,细胞凋亡实验结果显示敲减PBK后D341细胞凋亡水平明显升高,而Daoy细胞凋亡水平变化无显著性差异.
PBK敲减的Daoy与D341Med(人髓母细胞瘤细胞)体外功能实验结果未能完全符合预期,可能原因为PBK敲减效率不够以及体外实验的实验周期较短.小鼠原位成瘤后进行小动物活体光学成像实验结果提示,与空转对照Daoy相比,敲减PBK后的Daoy在原位成瘤小鼠模型中增殖能力明显受到抑制.研究结论靶向PBK可以抑制髓母细胞瘤细胞的增殖与诱导肿瘤细胞凋亡,PBK可能是髓母细胞瘤潜在的预后标志物以及靶向治疗的有效靶点.
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