COLO205细胞
COLO205细胞是1957年由T.U.Sample等从患有结肠癌的70岁男性白人的腹水中分离的.该病人在取腹水样品前已用5-氟尿嘧啶治疗4~6周.角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性.
📌 参考资料/链接：
Molecular analysis of functional redundancy among anti-apoptotic Bcl-2 proteins and its role in cancer cell survival[J].Joshua M.Eichhorn,Sarah E.Alford,Nandini Sakurikar,Timothy C.Chambers.Experimental Cell Research.2014(2)
📄 详细内容
用于shRNA介导PIAS3表达下调对人结肠癌COLO205细胞增殖和凋亡的影响研究
检测取自人体不同部位,不同Dukes分期的人结肠癌细胞株SW480(取自结肠癌组织,Dukes B期),SW620(取自结肠癌淋巴转移组织,Dukes C期)及COLO205(取自结肠癌腹腔转移腹水组织,Dukes D期)中PIAS3的表达水平,筛选PIAS3相对高表达细胞株进行shRNA质粒转染干预实验.
通过转染PIAS3shRNA质粒,下调结肠癌细胞株中PIAS3基因的表达水平,研究该基因的差异性表达对结肠癌细胞增殖活性,凋亡和细胞周期的影响.
方法:运用实时荧光定量PCR(Real-TimePCR)及蛋白免疫印迹(Western blot)检测SW480,SW620及COLO205三种入结肠癌细胞株中PIAS3基因的表达水平;运用脂质体介导将PIAS3shRNA质粒及无关序列shRNA对照质粒转染入人结肠癌细胞株,干预后区分为:PIAS3shRNA转染组(转染PIAS3shRNA质粒),无关序列shRNA转染组(转染无关序列对照质粒)及空白对照组(不进行转染干预).
采用Real-Time PCR.Western blot检测质粒转染干预对PIAS3基因的抑制效果;MTT(噻唑蓝)法检测PIAS3表达下调对结肠癌细胞增殖活性的影响;流式细胞仪检测PIAS3表达下调对人结肠癌细胞周期和凋亡的影响.
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