2,3-环氧角鲨烯羊毛固醇环化酶抗体
2,3-环氧角鲨烯羊毛固醇环化酶抗体是一类可以特异性结合2,3-环氧角鲨烯羊毛固醇环化酶的多克隆抗体,可用于检测2,3-环氧角鲨烯羊毛固醇环化酶的免疫组化(IHC),免疫印迹(WB),酶联免疫(ELISA),IF,IP,流式细胞术等实验. 角鲨烯是一种在人体胆固醇合成等代谢过程中产生的多不饱和烃类,含有6个异戊二烯双键,属于萜类化合物,很多食物中含有角鲨烯,其中鲨鱼肝油中含量较高,在橄榄油和米糠油等少数几种植物油中角鲨烯含量也相对较高.
📌 参考资料/链接：
Linking genotype and phenotype of Saccharomyces cerevisiae strains reveals metabolic engineering targets and leads to triterpene hyper-producers.[J].Karina M Madsen,Gupta D B R K Udatha,Saori Semba,Jose M Otero,Peter Koetter,Jens Nielsen,Yutaka Ebizuka,Tetsuo Kushiro,Gianni Panagiotou.PLoS ONE.2017(3)
📄 详细内容
用于金龙胆草皂苷生物合成途径相关基因的克隆鉴定及酿酒酵母合成皂苷的研究
利用转录组测序技术建立金龙胆草叶片转录组数据库,从中筛选获得了大量与Conyzasaponins合成相关的基因,包括前体2,3环氧鲨烯合成途径关键酶基因,催化合成三萜皂苷骨架的氧化鲨烯环化酶(OSC)家族基因,调控皂苷结构多样性的细胞色素P450(CYP450)家族基因和糖基转移酶(UGT)家族基因等,初步阐明了Conyzasaponins生物合成代谢流.通过构建酿酒酵母Conyzasaponins合成途径,实现了重要中间产物β香树脂醇,齐墩果酸以及皂苷前体(3-O-Glc-oleanolic acid)在酵母中的合成,为酵母生产Conyzasaponins提供了理论基础和前体材料.
具体结果:1,以Illumina Solexa Hi Seq 2500测序系统为平台,金龙胆草叶片为材料,获得了42,903,527条Read序列,成功构建了金龙胆草叶片转录组数据库,组装得到了80,930条Unigene序列.
其中45.27%在Gen Bank数据库得到了注释,30.33%在Protein family数据库得到了注释,32.36%在Swiss-Prot数据库得到了注释;根据Gene Ontology数据库这些Unigene可分为细胞组分,分子功能以及生物过程3大类52小类,根据eu Karyotic Orthologous Groups数据库可分为信号储存与处理,细胞过程与信号,代谢和无特征4大类25小类.
通过Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes数据库搜索,发现这些Unigenes共注释到117条代谢通路上,其中包括与金龙胆草主要活性成分三萜皂苷合成相关的萜类骨干合成通路(ko00900),与金龙胆草特征成分苦蒿素合成相关的二萜类合成通路(ko00904),与金龙胆草黄酮合成相关的黄酮类化合物合成通路(ko00940,ko00941,ko00944)以及与金龙胆草多糖合成相关的聚糖生物合成通路(ko00510,ko00514)等.
2,以各数据库注释信息为基础,对金龙胆草皂苷合成途径的基因进行筛选,获得了3条3-羟基-3甲基戊二酸单酰Co A还原酶(HMGR)基因,3条法呢基焦磷酸合酶(FPPS)基因,1条鲨烯合酶(SQS)基因,2条鲨烯环氧酶(SQE)基因,10条氧化鲨烯环化酶(OSCs)基因,26条细胞色素P450单加氧酶(CYP450)基因,7条NADPH-细胞色素P450还原酶(CPR)基因以及47条葡糖基转移酶(UGT)基因;
3,利用基因工程手段构建上述8个基因微生物表达载体,实现大肠杆菌或酿酒酵母中的高效表达,通过高效液相色谱(HPLC),气相色谱质谱联用(GCMS)以及分光光度法验证功能.
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