ANTI-BETA-ACTIN抗体是ANTI-BETA-ACTIN为抗原制得的免疫抗体,可以特异性结合BETA-ACTIN.主要用于检测BETA-ACTIN的Western Blot,IHC-P,IF,ELISA,Co-IP等多种免疫学实验. β-actin由375个氨基酸组成,这是针对大多数组织和细胞来说的,它广泛分布于细胞浆内,表达量非常丰富,其含量占所有细胞总蛋白的50%.但是在一些少量特殊的情况下,如脂肪组织或细胞内,β-Actin的表达量就很少.
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用于大鼠GAPDH,β-actin mRNA降解与死亡时间推断的相关性研究
应用一步法荧光标记逆转录-聚合酶联反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测了大鼠死后不同时间间隔脑,肝,脾,肾管家基因磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde phosphate dehydrogenase,GAPDH)及β-肌动蛋白(β-actin)mRNA的降解情况,旨在为PMI推断提供一种新的指标.
通过系统观察大鼠死后不同时间脑,肝,脾,肾管家基因GAPDH及β-actin mRNA的降解规律,确定大鼠死后不同组织GAPDH及β-actin mRNA的检测时限,探讨其在PMI推断上的法医学应用价值,为PMI推断的研究提供一种新的,可靠的检测指标.方法:Wistar大鼠56只,雌雄不限,体重200-250g,断颈处死后置于20℃温度控制系统内.
分别于死后0h,8h,16h,24h,32h,40h,48h,72h,4d,5d,6d,7d,8d,9d解剖(n=4),按照RNA抽提的方法,分别提取大鼠脑,肝,脾,肾的总RNA,利用ABI 9700型PCR基因扩增仪,通过一步法复合荧光RT-PCR技术扩增,各时间点扩增产物分别在ABI 3100型DNA遗传分析仪上进行电泳分离,并应用其自带的分析软件(GeneScan Analysis Version 3.1),通过与Genescan-500TM ROX(marker)标准,确定脑,肝,脾,肾管家基因GAPDH及β-actin mRNA转化的PCR产物,记录并分析每个特异性峰的峰面积(Peak Area),各时间点与死后即时(0h)的峰面积之比值作为该点mRNA的相对含量.以未加RT/PlatinumTaq混合酶的作为实验阴性对照组.
结果:大鼠死后7d脑组织,48h肝组织,32h脾组织,40h肾组织内均可检测到GAPDH mRNA,8d脑组织,72h肝组织,40h脾组织,48h肾组织内均可检测到β-actin mRNA,且其量均呈规律性下降趋势(电泳峰面积逐渐变小,谱带亮度逐渐变暗并最终消失),其扩增产物的降解过程呈现出一定的规律性.
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