ANTI-RAT BOK
ANTI-RAT BOK是以ANTI-RAT BOK为抗原的免疫蛋白,可以特异性结合RAT BOK,主要用于检测RAT BOK的Western blotting,Immunohist℃ry,ELISA,IF,IHC-P,IHC-F等生物实验.bok(Bcl-2-related ovarian killer)是Bcl-2家族成员中的促凋亡成员,Bcl-2基因(即B细胞淋巴瘤/白血病-2基因)是一种癌基因,它具有明显抑制细胞凋亡的作用,并且近年来的一些研究已开始揭示这一作用的机制.自从1972年Kerr提出细胞凋亡(apoptosis)的概念至今,人们对细胞凋亡现象进行了广泛,深入的研究.但是,凋亡的分子和生化机制迄今尚未彻底明了,而已形成的初步认识大多源于对Bcl-2基因家族的研究.
📌 参考资料/链接:
Integrated Molecular Characterization of Testicular Germ Cell Tumors[J].Hui Shen,Juliann Shih,Daniel P.Hollern,Linghua Wang,Reanne Bowlby,Satish K.Tickoo,Vésteinn Thorsson,Andrew J.Mungall,Yulia Newton,Apurva M.Hegde,Joshua Armenia,Francisco Sánchez-Vega,John Pluta,Louise C.Pyle,Rohit Mehra,Victor E.Reuter,Guilherme Godoy,Jeffrey Jones,Carl S.Shelley,Darren R.Feldman,Daniel O.Vidal,Davor Lessel,Tomislav Kulis,Flavio M.Cárcano,Kristen M.Leraas,Tara M.Lichtenberg,Denise Brooks,Andrew D.Cherniack,Juok Cho,David I.Heiman,Katayoon Kasaian.Cell Reports.2018(11)
📄 详细内容
用于BOK对睾丸癌细胞恶性生物学行为的影响及可能机制的研究
应用免疫组织化学及蛋白质印迹的方法来检测BOK蛋白在10例睾丸癌及癌旁组织中的表达情况,通过BOK过表达及敲低的方法进一步研究其有关生物学行为及可能的机制.
研究方法:1,本研究收集睾丸癌及相应癌旁组织10例,标本通过固定包埋,HE染色后经病理医师明确诊断.2,应用免疫组织化学染色方法检测BOK抗体在睾丸癌组织及对应癌旁组织中蛋白表达情况.
3,细胞培养和转染:两个TC细胞系(TCam-2和I-10)和正常睾丸Hs1.Tes购自美国典型培养物保藏中心,在含有10%胎牛血清,100 U/ml青霉素钠,100 mg/ml链霉素的DMEM和F-12K培养基中培养.当细胞生长达到50-70%汇合时,使用DNA转染试剂转染细胞.
4,Western blot分析:使用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳提取总蛋白质,然后转移到硝酸纤维素膜上.印迹膜与1:500稀释的BOK抗体或胱天蛋白酶-3/裂解的半胱天冬酶-3抗体一起温育.洗涤后,将膜与辣根过氧化物酶连接的山羊抗兔1:2000稀释液一起温育.使用Eas ySee Western印迹试剂盒进行测定.
5,CCK8分析:转染后24小时将细胞消化,计数,接种于96孔板中,培养0,12,24,36和48小时,最后使用细胞计数试剂盒进行评估.
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