7脱氢胆固醇还原酶抗体
7脱氢胆固醇还原酶抗体是可以特异性结合7脱氢胆固醇还原酶的免疫蛋白,其是将7脱氢胆固醇还原酶注射到无菌动物体内进行系统免疫后在其血清中纯化制得的高纯度免疫蛋白.HCR7是将7-脱氢胆固醇(7-DHC)转化成胆固醇的关键酶,DHCR7突变的病人表现智力发育障碍,但是并不清楚DHCR7如何调控先天免疫抗病毒感染的功能.通过构建条件性敲除DHCR7的小鼠,敲减或敲除DHCR7的巨噬细胞,利用小分子抑制剂阻断DHCR7的酶活等策略,都能显著增强病毒感染介导的IFNβ产生.并且,病毒感染的肝脏组织,DHCR7缺失或其抑制子处理的巨噬细胞升高7-DHC的含量,外加天然产物7-DHC也能促进巨噬细胞抗感染的功能.
📌 参考资料/链接：
Increasing cholesterol synthesis in 7-dehydrosterol reductase(DHCR7)deficient mouse models through gene transfer[J].Xavier Matabosch,Lee Ying,Montserrat Serra,Christopher A.Wassif,Forbes D.Porter,Cedric Shackleton,Gordon Watson.Journal of Steroid Bi℃hemistry and Molecular Biology.2010(5)
📄 详细内容
用于7-脱氢胆固醇还原酶基因在小鼠胚胎腭突发育中的作用研究
7-脱氢胆固醇还原酶基因(Dhcr7)在小鼠胚胎腭突发育中的表达及表达量变化,Dhcr7表达下调对腭突发育融合的影响,及Dhcr7在腭突发育中参与的音猬因子(Shh)信号通路的研究.
方法:1:取E13.5,E14.5和E15.5天的小鼠胚胎的腭突,免疫组织化学观察Dhcr7蛋白在腭突中的表达定位,逆转录式聚合酶链式反应法检测Dhcr7mRNA的表达变化,Western blot法检测Dhcr7蛋白的表达变化.
2:构建抑制Dhcr7基因表达的siRNA重组腺病毒载体.取E13.5天的腭突进行体外培养,随机分为正常对照组,阴性对照腺病毒组和siDhcr7-腺病毒组,培养48h后分别固定和提取总RNA,总蛋白,进行组织染色,扫描电镜和RT-PCR,WB分析,siDhcr7-腺病毒组于48h后更换培养基随机分为四组分别添加Ong/ml,200ng/ml,400ng/ml和600ng/ml浓度的胆固醇,继续培养72h后固定,SEM和组织染色观察融合情况.
3:取E13.5天腭突进行培养,分为空白对照组,siDhcr7-腺病毒组和Dhcr7抑制后加胆固醇组,前两组于培养48后更换不含胆固醇培养基,最后一组更换含有600ng/ml胆固醇培养,继续培养72h;分别进行固定,行组织染色和SEM观察形态变化:分别提取总RNA和总蛋白质应用RT-PCR和WB检测Dhcr7,Shh和Bmp2表达量的变化.
结果:1.Dhcr7主要表达在EPM细胞,E15.5的Dhcr7mRNA表达量与E13.5和E14.5相比分别减少了30.3%和22.6%,差异有统计学意义(P<0.05),E13.5于E14.5相比差异没有统计学意义(P>0.05);E15.5的蛋白表达量与E13.5和E14.5相比分别减少了55.6%和53.9%,差异有统计学意义(P<0.05),E13.5于E14.5相比差异没有统计学意义(P>0.05).
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