8-羟基脱氧鸟苷抗体
8-羟基脱氧鸟苷抗体是可以特异性结合8-羟基脱氧鸟苷的免疫蛋白,其是将8-羟基脱氧鸟苷注射到无菌动物体内进行系统免疫后在其血清中纯化制得的高纯度免疫蛋白.
📌 参考资料/链接：
Increased oxidative stress and cytokinesis-bl℃k micronucleus cytome assay parameters in pregnant women with gestational diabetes mellitus and gestational arterial hypertension[J].Mina Toljic,Amira Egic,Jelena Munjas,Natasa Karadzov Orlic,Zagorka Milovanovic,Aleksandra Radenkovic,Jovana Vuceljic,Ivana Joksic.Reproductive Toxicology.2017
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用于8-羟基脱氧鸟苷ELISA实验方法的建立及其在妊娠糖尿病研究中的初步应用研究
8羟基-2-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2deoxyguanosine,8-OHdG)是活性氧自由基如羟自由基,单线态氧等攻击DNA分子中的鸟嘌呤碱基第8位碳原子而产生的一种氧化性加合物,若不被及时清除可引起DNA复制过程中G-C/A-T型碱基配对错误从而引起基因点突变甚至癌变.研究表明糖尿病,癌症,以及心血管疾病的发病和疾病发展都与氧化损伤有着密切的关系,也都可以检测到机体8-OHdG含量的升高,因此测定机体8-OHdG水平不仅可以评估机体受到的氧化损伤程度,还可以辅助相关疾病的诊断或反映相关疾病的进程.获得8-OHdG特异性配对抗体,建立生物素-亲和素双抗夹心ELISA检测8-OHdG的方法,并在此基础上检测妊糖患者和健康孕妇的8-OHdG含量,对比研究妊娠糖尿病与8-OHdG水平的关系.
研究方法:本研究通过偶联形成8-OHdG-mcKLH复合物作为免疫原,免疫注射Balb/C小鼠,并进行细胞融合得到单克隆抗体.通过ELISA法筛选获得阳性杂交瘤细胞株,再对细胞株进行扩大化生产,并对得到的腹水抗体进行纯化,筛选得到8-OHdG的高特异性配对抗体.通过测定抗体纯度,交叉反应性,效价等方法判断该单克隆抗体的特异性和灵敏性.以配对抗体为基础,通过筛选包被液,封闭液,包被抗体与酶标抗体的浓度等条件,建立生物素-亲和素标记的双抗夹心ELISA定量检测8-OHdG的方法,并通过批内批间实验,回收率等方法来评价该检测方法的稳定性及准确性.
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