ANTI-IL-12抗体是一类可以特异性结合ANTI-IGE的多克隆抗体,主要用于检测ANTI-IGE的Western Blot,IHC-P,IF,ELISA,Co-IP等多种免疫学实验. 检测原理:双抗体夹心法测定标本中ANTI-IGE水平.用纯化的ANTI-IGE抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入ANTI-IGE,再与HRP标记的ANTI-IGE抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色.TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色.颜色的深浅和样品中的ANTI-IGE呈正相关.用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中ANTI-IGE浓度.
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用于康复新联合5-ASA对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜IFN-γ,IL-4,IL-12表达的影响研究
观察康复新对大鼠结肠黏膜组织中IFN-γ,IL-4及IL-12表达的影响,探讨康复新,5-ASA及两者联合用药对治疗大鼠UC的疗效.
方法:按照随机原则,将50只SD大鼠随机抽取10只作为正常对照组,余40只大鼠采用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-TNBS)造模法制备UC大鼠模型,4只大鼠于造模过程中死亡,剩余的36只大鼠再次按照随机原则分为4组,分别为模型组,5-ASA组,康复新组,康复新与5-ASA联合用药组,给予2,4,6-TNBS造成模后,正常对照组以及模型组大鼠分别给予生理盐水进行(1ml/200g体重)灌肠;5-ASA组:5-ASA以(1ml/200g体重)的量进行灌肠;
康复新组:以康复新液(1ml/200g体重)进行灌肠;康复新+5-ASA组:以5-ASA(1ml/200g体重)的量灌肠(上午8时)和以康复新(1ml/200g体重)的量灌肠(下午4时),每天给予灌肠1次,共7天.每天记录大鼠的一般情况,包括腹泻,便血及体重改变等情况,用药21天后,各组大鼠用2%戊巴比妥0.2ml/100g体重腹腔注射麻醉,腹正中切口,取血和结肠黏膜组织备用.
采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中IFN-γ,IL-4,IL-12的水平,采用免疫组织化学法检测大鼠结肠黏膜中IFN-γ,IL-4,IL-12的表达,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测结肠黏膜中IFN-γ,IL-4,IL-12mRNA的表达.
结果:与模型组相比,康复新,5-ASA,联合治疗组大鼠血清中IL-12,IFN-γ的表达降低(P<0.01),IL-4的表达升高(P<0.01);与康复新组和5-ASA组相比,联合治疗组大鼠血清中IL-12和IFN-γ的水平表达明显下降(P<0.01),而IL-4的表达水平明显升高(P<0.01).康复新组与5-ASA组比较无显著差异(P>0.05).
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