CD9抗体
CD9抗体是一个非偶联,兔源,抗CD9多克隆抗体.它可用于人,小鼠,大鼠背景下WB,IHC-P,ICC/IF,IP,FC实验,且不带标记. CD9,即白细胞分化抗原9,别名MIC3,TSPAN29,GIG2,MRP1等.它是一种多次跨膜的糖蛋白,属于四跨膜蛋白家族(Tetraspanin),在多种细胞表面表达,包括白细胞,血小板,内皮细胞等.CD9的作用机制涉及与多种蛋白质相互作用,形成四跨膜蛋白富集的微区(TEMs),调控细胞黏附,细胞运动,细胞信号传导等过程.CD9在细胞间的相互作用,免疫应答,肿瘤转移,精卵融合等过程中发挥重要作用.例如,在肿瘤细胞中,CD9的表达可能与肿瘤的侵袭性和转移能力相关,而在免疫细胞中,它参与调节免疫突触的形成和细胞外囊泡的功能.此外,CD9还可能作为某些疾病的治疗靶点或生物标志物,具有重要的临床应用潜力.
📌 参考资料/链接：
Human umbilical cord mesenchymal stem cell-derived exosome suppresses programmed cell death in traumatic brain injury via PINK1/Parkin-mediated mitophagy.[J].Zhang Li;Lin Yixing;Bai Wanshan;Sun Lean;Tian Mi.CNS neuroscience&therapeutics.2023
📄 详细内容
CD9抗体可以用于MSCs源性外泌体对创伤性脑损伤后外周免疫反应的作用研究
实验通过动物实验和细胞分子实验分析MSCs源性外泌体对TBI后大鼠外周免疫细胞活化情况,炎症因子表达水平,损伤脑组织炎症反应以及神经细胞凋亡情况的影响,进而评估MSCs源性外泌体对TBI后大鼠外周免疫反应的干预效果,为探索TBI后外周免疫异常治疗的新策略提供理论参考.
方法:1.取成年SD大鼠骨髓来源的充质干细胞(MSCs),使用专用培养基培养,收取MSCs培养基上清液,利用超高速离心法从中分离出外泌体,并利用电镜,纳米颗粒跟踪分析(NTA)以及CD9抗体蛋白质印记实验(WB)进行外泌体鉴定.2.将成年SD大鼠(8周龄,180-220g)随机分成4组,分别为假损伤组(Sham),创伤性脑损伤组(TBI),假损伤+外泌体组(Sham+exo)和创伤性脑损伤+外泌体组(TBI+exo).随后我们利用控制性皮层损伤方法来构造SD大鼠脑创伤模型,在TBI组及TBI+exo组模型构造后的6个小时内将MSCs源性外泌体通过尾静脉途径注射入大鼠体内.在术后第1,3,7,28天分别收集大鼠外周血,梯度离心法分离出外周血单个核细胞(PBMCs)以及血清,流式细胞术(FCM)检测T细胞亚群,B细胞百分比,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测干扰素-γ(IFN-γ),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血清中免疫球蛋白A(IgA),免疫球蛋白G(IgG),免疫球蛋白M(IgM)的表达水平.对比各组间的差异,分析TBI对大鼠外周免疫反应的诱发作用以及MSCs源性外泌体对TBI后外周免疫反应干预作用.3.在TBI后第1,3,7,14,28天利用改良神经功能缺损评分(mNSS)表评估各组大鼠运动感觉功能.在TBI后第1,3,7,28天分别处死各组部分大鼠,分离脑组织,利用尼氏染色和TUNEL染色观察神经元凋亡情况.将大脑皮层组织制备成匀浆,先利用ELISA实验检测脑皮质中促炎因子白介素1β(IL-1β),白介素6(IL-6),TNF-α,IFN-γ和抑炎因子白介素4(IL-4),白介素10(IL-10),转化生长因子β(TGF-β)的表达水平.然后利用RT-PCR检测M1型小胶质细胞表面分子INOS和M2型小胶质细胞表面分子Arg-1的表达水平.对比各组间差异,分析MSCs源性外泌体干预TBI大鼠外周免疫反应后对神经功能恢复的作用.
CD9抗体结果:1.通过控制性皮层损伤方法对大鼠脑组织进行打击,并成功构建TBI大鼠模型.通过皮层打击后大鼠立即出现呼吸浅慢,毛发竖立等表现,待大鼠清醒后则会出现打击部位对侧肢体瘫痪,向对侧绕圈爬行,分离其脑组织发现右侧大脑皮层出现明显病灶.2.从MSCs中成功提取到外泌体.通过电镜,纳米颗粒跟踪分析,CD9抗体Western Blot验证了其为直径主要在100nm-200nm之间的呈典型的“杯盘”状的囊性小泡,CD9,CD81表达明显.
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