2型补体受体抗体是一类可以特异性结合2型补体受体的多克隆抗体蛋白,主要用于需要检测2型补体受体的相关实验. 补体是一种血清蛋白质,存在于人和脊椎动物血清及组织液中,不耐热,活化后具有酶活性,可介导免疫应答和炎症反应.可被抗原-抗体复合物或微生物所激活,导致病原微生物裂解或被吞噬.可通过三条既独立又交叉的途径被激活,即经典途径,旁路途径和凝集素途径. 2型补体受体即CD21,补体片段C3d,C3dg的受体.主要表达于人成熟B细胞和滤泡树突状细胞表面,可调节B细胞活化,增殖和IgE产生,也是EB病毒受体,与鼻咽癌发生相关.
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用于B淋巴细胞在功能性治愈的慢性乙型肝炎患者的免疫学特征研究
通过双荧光染料偶联HBV特异性B细胞,直接体外检测实现功能性治愈的CHB患者B细胞亚群及功能受体的特征,探讨实现功能性治愈的适应性免疫机制.
[方法]纳入NAs经治联合Peg-IFNα治疗的患者(IFN-α组),共25人;未治疗CHB患者(CHB组),共7人.根据治疗终点是否发生血清学转换,IFN-α治疗组分为:治愈组(Cure,CR组):发生HBs Ag血清学转换,伴或不伴HBs Ab产生,HBe Ag(-);未治愈组(Non-Cure,NCR组):未发生HBs Ag血清学转换或HBe Ag(+).分离患者外周血PBMC,将重组HBs Ag,HBc Ag分别与D488,D650染料结合,合成HBV特异性偶联;流式细胞术检测患者外周血总B细胞,HBs Ag/HBc Ag特异性B细胞中c MBC(CD21+,CD27+),act MBC(CD21-,CD27+),at MBC(CD21-,CD27-),Ig M+,Ig G+在不同分组间细胞频数的差异,同时检测活化受体CD38,CD69以及抑制性受体Fc RL5,PD-1在HBs Ag特异性B细胞的表达,使用t检验或方差分析比较组间差异.使用pearson线性回归分析相关性.
[结果](1)总B细胞及记忆B细胞中各亚组及膜免疫球蛋白表达的比较IFNα治疗组的患者外周血总B细胞中c MBC与CHB组,HC组相比下降(p=0.12,p=0.02).IFNα治疗组中记忆B细胞c MBC频数与HC组相比下降(p=0.002),而act MBC,at MBC频数较CHB组及HC组升高(act MBC p=0.03,p=0.011)(at MBC p=0.019,p=0.048).经过Peg-IFNα序贯联合NAs治疗后,IFNα组患者总B细胞中Ig G+细胞频数低于CHB组(p=0.02).IFNα组患者记忆B细胞中Ig M+细胞频数低于CHB组,HC组(p=0.12,p=0.12).
(2)HBV特异性B细胞不同亚组及膜免疫球蛋白比较分析IFNα组中,CR组HBs Ag特异性B细胞中c MBC频数相比NCR组升高(p=0.12),IFNα组HBs Ag特异性B细胞中c MBC频数与血清HBs Ab水平呈正相关关系(R-2=0.1890,F=0.0299,p=0.03).IFNα组HBc Ag特异性B细胞中c MBC,at MBC,Ig G+细胞频数显著低于CHB组(p=0.0002,p=0.04,p=0.0009);Ig M+细胞频数显著高于CHB组(p=0.0009).所有患者HBc Ag特异性B细胞频数显著高于HBs Ag特异性B细胞(p＜0.001).
(3)总B细胞及HBs Ag特异性B细胞功能受体及抑制受体表达比较IFNα组总B细胞,HBs Ag特异性B细胞中CD38细胞频数相比CHB组显著升高(p=0.004,p=0.002);IFNα治疗组HBs Ag特异性B细胞中,CD69 MFI相比CHB组显著升高(p=0.004);IFNα组中,CR组HBs Ag特异性B细胞中CD69细胞频数较NCR组显著升高(p=0.04).抑制受体FcRL5,PD-1在不同组间无差异,集中表达于at MBC.
[结论]NAs联合Peg-IFNα治疗使患者外周血总B细胞及记忆B细胞亚群发生改变,发生抗体亚型转换的记忆B细胞增多.HBs Ag特异性B细胞表面活化受体表达增强;这在临床治愈组更显著.HBs Ag特异性B细胞中c MBC频数与血清HBs Ab水平相关,提示这一亚群在功能治愈中具有重要作用.
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