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BMDC小鼠树突状细胞

BMDC小鼠树突状细胞来源于小鼠股骨和胫骨中的骨髓,中文全称为树突状细胞,因其成熟时伸出许多树突样或伪足样突起而得名. 树突状细胞(Dendritic cells,DC)是机体功能最强的专职抗原递呈细胞(Antigen presenting cells,APC),它能高效地摄取,加工处理和递呈抗原,未成熟DC具有较强的迁移能力,成熟DC能有效激活初始T细胞,处于启动,调控,并维持免疫应答的中心环节.
📌 参考资料/链接:
Effects of Portulaca oleracea L.Polysaccharides on Phenotypic and Functional Maturation of Murine Bone Marrow Derived Dendritic Cells[J].Rui Zhao,Tao Zhang,Hui Zhao,Yaping Cai.Nutrition and Cancer.2015(6)

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用于锦灯笼果实多糖通过小鼠树突状细胞表面TLR4增强免疫作用机制研究
锦灯笼果实水溶性多糖(PPSB)在白色念珠菌核酸疫苗中发挥佐剂效应,且这种免疫增强作用与小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)表型和功能成熟有关,并初步证明PPSB在BMDC表面的受体为TLR4.
方法:1.PPSB通过MAPKs及NF-κB信号通路对BMDC发挥作用本实验分离提取C57BL/6小鼠骨髓细胞,用IL-4,GM-CSF联合培养BMDC至第6天,分别用浓度为10µg/ml,30µg/ml,50µg/ml的PPSB处理未成熟的BMDC,以RPMI1640培养基作为空白对照组,Western blot法检测PPSB对BMDC信号通路的影响.结果显示,与空白对照组相比,不同浓度PPSB均能增加MAPKs(包括ERK1/2,JNK,p38),NF-κB p65及IκBα的磷酸化水平,说明PPSB可以通过活化MAPKs及NF-κB两条信号通路对BMDC发挥作用.
2. BMDC表面TLR4影响PPSB的免疫增强作用为进一步证明PPSB与BMDC表面受体TLR4的作用关系,本实验分离提取TLR4缺陷型及野生型C57BL/10小鼠骨髓细胞,用IL-4,GM-CSF体外诱导培养BMDC至第6天,分别用浓度为10µg/ml,30µg/ml,50µg/ml的PPSB处理两种小鼠BMDC,并通过以下两种方法进行分析:(1)通过Western blot法检测WT和TLR4-/-小鼠树突状细胞MAPKs,NF-κB及IκBα磷酸化情况.研究结果表明,PPSB可以通过BMDC表面TLR4激活MAPKs和NF-κB信号通路;
(2)通过ELISA法检测PPSB对WT和TLR4-/-小鼠BMDC细胞因子分泌的影响.结果证实,PPSB诱导BMDC分泌IL-4,IL-10,IL-12及IL-18与其表面TLR4有关.
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