BALL-1是一种重要的人淋巴细胞系,它最初从急性淋巴细胞白血病(ALL)患者体内分离出来,因此被称为BALL-1.BALL-1细胞被普遍用作白血病研究的模型细胞,因其细胞形态和生理特征与真实白血病细胞高度相似,因此被广泛用于ALL的发病机制,遗传与表观遗传学,药物敏感性和耐药性的研究.此外,BALL-1细胞源源不断地被用于疗效评估和药物筛选,因此,研究BALL-1的来源,技术和应用非常重要.
📄 详细内容
BALL-1可以用于白喉毒素/人B细胞活化因子融合蛋白对人急性白血病BALL-1细胞杀伤作用实验性研究
白喉毒素／人B细胞活化因子融合蛋白对人急性白血病BALL-1细胞杀伤作用研究背景急性白血病(acute leukemia)是儿童常见的血液系统肿瘤,急性淋巴细胞白血病约占70%,其中80%来源于B细胞系,其发生率和病死率均呈上升趋势,严重威胁人类,特别是儿童的健康.通常采用的联合化疗的治疗方法,但这些治疗措施抗肿瘤能力低,也就是选择性差,并有明显的全身毒副作用.长期使用非特异免疫抑制剂容易诱导药物耐药,并可使患者免疫功能受到严重损害,导致许多并发症.免疫毒素由于其靶向治疗的特点成为当前肿瘤治疗研究的热点领域之一.
免疫毒素主要通过毒性分子中的不同结构域间的协调配合而发挥杀伤作用,其过程主要包括:免疫毒素中的载体发挥靶向作用与目标细胞结合;免疫毒素中的毒性分子内化入细胞;毒性分子的活性作用主要是抑制蛋白表达,以致细胞死亡.免疫毒素的毒性部分主要来源有一下几类:植物来源的毒素,细菌来源的毒素,人源性蛋白毒素以及真菌来源的毒素等.
白喉毒素属于细菌来源的毒素,含有于细胞结合区和酶活性区,C片段是其酶活性区,主要活性作用是失活核蛋白体上的肽链EF-2,从而抑制细胞合成蛋白质,导致细胞变性坏死,应用这个优势特性发挥杀伤肿瘤细胞的作用.
通过以白喉毒素为毒性部分而构建免疫毒素DT388sBAFF来探讨其是否对人急性白血病BALL-1细胞存在抑制作用,从而为急性白血病治疗提供新的研究方向.研究目的研究免疫毒素DT388sBAFF(白喉毒素／人B细胞活化因子融合蛋白)的对人急性白血病BALL-1细胞的杀伤作用.
方法1.利用实时荧光定量PCR技术检测人急性白血病BALL-1细胞上BAFF三种受体(BAFF-R,TACI和BCMA)的表达水平.
2. 利用FITC荧光素标记技术检测重组免疫毒素DT388sBAFF与人急性白血病BALL-1细胞结合能力.
3. 细胞毒性实验检测重组免疫毒素DT388sBAFF对人急性白血病BALL-1细胞的杀伤作用.
4. 利用SPSS18.0统计软件中的方差分析功能对结果进行统计学分析.
结果1.BAFF的三种受体(BAFF-R,TACI和BCMA)中,只有BAFF-R在人急性白血病BALL-1细胞上高表达(P<0.05),TACI和BCMA基本不表达(P>0.05).
2. FITC荧光素标记重组免疫毒素DT388sBAFF后在倒置荧光显微镜下可观察到人急性白血病BALL-1细胞有较强绿色荧光出现,而阴性对照组U937细胞则未见荧光,而阳性对照Hmy2.CIR细胞亦出现较强绿色荧光,而且急性白血病BALL-1细胞和阳性对照Hmy2.CIR细胞只同时表达BAFF一种受体:BAFF-R,这表明重组免疫毒素DT388sBAFF与上述细胞表面受体BAFF-R具有特异性结合能力.
3. 细胞毒实验检测结果显示了较强的抑制效应,即重组免疫毒素DT388sBAFF能抑制人急性白血病BALL-1细胞,且具有剂量依赖关系,即人急性白血病BALL-1细胞受抑制作用随着重组免疫毒素DT388sBAFF浓度的增加,而越强(P<0.05),这与阳性对照细胞Hmy2.CIR细胞结果一致(P<0.05),而不同浓度的重组免疫毒素DT388sBAFF之于对照阴性组U937细胞没有显示具有统计学意义的抑制效应(P>0.05).
结论:免疫毒素DT388sBAFF具有靶向杀伤人急性白血病BALL-1细胞的活性,为人急性白血病治疗提供了新的研究方向.
联系我们可以获取更多内容.
如有产品相关项目调研或推广服务, 请致函联系我们