C-JUN抗体
C-JUN抗体是一个非偶联,抗C-JUN单克隆抗体.它可用于人,小鼠,大鼠背景下的多种实验,如WB(Western Blot,蛋白质印迹法),ICC(免疫细胞化学),IHC-P(免疫组织化学染色)和IP(免疫沉淀)等,并且不带标记. C-JUN原癌基因属于bZIP家族核内转录因子成员之一,可以结合在许多基因的启动子上参与基因转录的调控.它可以与其他家族转录因子如TNF-α,PU.1,Sp1,fas,ras,C/EBP,ATF/CREB等相互作用,发挥协同效应.C-JUN的调控范围十分广泛,能被各组织中的多种化学物质激活并受其影响. C-Jun氨基末端转移酶(JNK)是丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族的一员,能够使C-JUN氨基末端活性区Ser63和Ser73发生磷酸化的蛋白激酶.这是促分裂原活化的蛋白激酶超家族中的一个家族,包括JNK1,JNK2,JNK3.当其活化模体Thr-Pro-Tyr内的Thr,Tyr被JNKK1,JNKK2磷酸化后而激活,活化酶可磷酸化C-JUN等多种蛋白质,从而影响细胞凋亡,炎症和肿瘤的发生.
📌 参考资料/链接：
Cancer statistics in China,2015[J].Wanqing Chen;;Rongshou Zheng;;Peter D.Baade;;Siwei Zhang;;Hongmei Zeng;;Freddie Bray;;Ahmedin Jemal;;Xue Qin Yu;;Jie He.CA:A Cancer Journal for Clinicians,2016(2)
📄 详细内容
C-JUN抗体可以用于C-JUN转录调控FOXK1促进胃癌发生发展的机制研究
FOXK1为转录因子c-jun的转录激活靶点3.1 c-jun能与FOXK1的启动子区域结合并启动下游转录根据FOXK1启动子(600bp)内c-jun的三个潜在结合位点设计三对引物,扩增出FOXK1转录起始位点上游的三段启动子序列,分别插入到pGL3-Basic载体,构建出三个含不同结合部位的pGL3-FOXK1promoter(记为FOXK1p1,FOXK1p2和FOXK1p3).将上述FOXK1p和c-jun表达质粒或对照质粒共转染至MKN28中,进行双荧光素酶检测并比较各组荧光素酶活性差异.另外利用染色质C-JUN抗体免疫共沉淀(ChIP)的方法,再次明确c-jun与FOXK1启动子结合及其大致结合位点.3.2 c-jun能与FOXK1启动子区域结合设计突变引物,以FOXK1p为模板进行扩增得到c-jun结合位点突变的产物,纯化并酶切突变产物,再将其与酶切后的pGL3相连,然后转化入感受态细胞扩增,将突变质粒测序以确定突变成功并将其命名为FOXK1-mut.双荧光素酶检测并比较野生型和突变型的荧光素酶活性以明确c-jun结合的具体位置.再将不同量(0,0.3,0.5,0.8,1.0µg)的c-jun表达质粒和FOXK1p共转染至MKN28中,以明确FOXK1启动子被激活的程度是否随c-jun表达水平的递增而上升.
FOXK1与c-jun的表达在胃癌中具有相关性且与胃癌患者的预后相关4.1 FOXK1与c-jun的表达在胃癌细胞系中具有相关性提取人胃癌细胞系AGS,SGC7901,MGC803,BGC823,MKN45,MKN28的细胞蛋白,用western blottingC-JUN抗体检测不同胃癌细胞中FOXK1和c-jun的表达水平,并用细胞免疫荧光检测FOXK1和c-jun两中蛋白的细胞内亚分布.4-2FOXK1与c-jun在胃癌组织中高表达且其表达具有相关性收集90例胃癌及其癌旁组织,定制组织芯片,利用免疫组化染色检测FOXK1和c-jun在胃癌及其癌旁组织的表达水平,并由两名病理医生对染色程度进行评分;对评分进行散点分布,线性回归及相关分析以比较FOXK1和c-jun在胃癌及癌旁组织的表达差异,以及明确两种蛋白表达上的相关性.4.3 FOXK1/c-jun表达与胃癌患者临床病理参数的关系运用卡方检验分析FOXK1/c-jun的表达水平与胃癌患者临床病理参数之间的关系.4.4 FOXK1/c-jun表达与胃癌患者预后的关系收集105例胃癌患者的随访资料,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线;应用单因素和多因素COX回归模型分析影响胃癌患者生存的独立预后因素.
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