A375人恶性黑色素瘤细胞是一种常用的研究恶性黑色素瘤的细胞系.它是由美国国立癌症研究所(NCI)创建的一个细胞系,主要用于研究恶性黑色素瘤的生物学特性,药物敏感性以及可能的治疗方法.A375人恶性黑色素瘤细胞是从一名患有黑色素瘤的54岁女性患者的皮肤中分离出的一种细胞系.细胞携带BRAFV600E突变,并对MEK抑制高度敏感.有研究报道:使用维莫非尼(Vemurafenib)处理A375人恶性黑色素瘤细胞,增强了干扰素γ和IFNα2b对MHC I类和II类分子的诱导作用 A375人恶性黑色素瘤细胞具有以下特点: 形态特征:人恶性黑色素瘤细胞呈多角形或长条形,有多个突起,核较大,核质比高. 生长特性:人恶性黑色素瘤细胞生长迅速,分裂能力强,可以在体外持续传代. 黑色素生成能力:人恶性黑色素瘤细胞具有黑色素生成能力,因此常用于研究黑色素瘤的发生,发展和治疗. 药物敏感性:人恶性黑色素瘤细胞对多种抗癌药物具有敏感性,因此常被用于药物筛选和药效评价. 基因表达特征:人恶性黑色素瘤细胞具有一些与恶性黑色素瘤相关的基因表达特征,如BRAF,NRAS等突变基因的高表达. 通过研究A375人恶性黑色素瘤细胞,可以深入了解恶性黑色素瘤的生物学特性,为临床治疗提供理论依据和实验基础.
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A375人恶性黑色素瘤细胞可以用于五种中药单体对人恶性黑色素瘤细胞A375的体外增殖及酪氨酸酶活性作用的研究
姜黄挥发油对多种肿瘤细胞具有抑制作用,能显著减少肿瘤数目,缩小瘤体体积,其主要作用于肿瘤早期,还能预防肿瘤形成.
研究姜黄挥发油(turmeric volatile oil,TVO)对A375人恶性黑色素瘤细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制.
方法:不同浓度TVO在体外对A375人恶性黑色素瘤细胞的作用.细胞增殖-毒性检测(CCK8)法测不同浓度TVO(0160mg/L)在不同时间段(24h,48h,72h)对A375人恶性黑色素瘤细胞的增殖抑制率;根据CCK8结果选取有效最低药物浓度进行实验:吉姆萨染色,倒置显微镜观察细胞凋亡形态;DNA片段化检测细胞凋亡;流式细胞术测细胞凋亡率;Western blot检测Caspase-3及BIRC7蛋白表达.
结果:随TVO浓度的增加对A375人恶性黑色素瘤细胞生长具有显著的抑制增殖作用,CCK-8结果示浓度为(0,2.5,5,10,20,40,80,160mg/L)TVO,24h抑制率分别为(0,2.5,5,10,20,40,80,160mg/L)TVO,24h抑制率分别为(0.00±0.00,0.015±0.02,0.084±0.02,0.087±0.01,0.096±0,0.087±0.01,0.122±0.03,0.209±0.01);48h(0.00±0.00,0.005±0.00,0.139±0.02,0.160±0.01,0.217±0.03,0.225±0.02,0.246±0.01,0.355±0.01);72h(0.00±0.00,0.323±0.00,0.446±0.01,0.470±0.02,0.479±0.02,0.352±0.01,0.385±0.02,0.441±0.01),与0mg/L相比P<0.05;TVO诱导A375人恶性黑色素瘤细胞凋亡,药物诱导后细胞增殖变慢,贴壁性降低,形态变得不规则,见核固缩,核碎裂及核溶解,提取DNA凝胶电泳药物作48h后,可见凋亡典型的DNA梯状条带,并随药物浓度增加越明显细胞核碎裂;流式测细胞凋亡率,浓度为0,2.5,5,10mg/L的TVO,A375人恶性黑色素瘤细胞凋亡率分别为0,12.7,13.6,15.4%,死亡率仅为0.1%;Western blot测浓度为(0,2.5,5,10mg/L)TVO作用48h后,随药物浓度增高,凋亡相关蛋白Caspase-3,Caspase-1,TNR-α的表达量逐渐增多,凋亡抑制相关蛋白BIRC7,TAK1,JNK1,TAB1表达量逐渐减少,与0mg/L相比P<0.05.
结论:TVO对A375人恶性黑色素瘤细胞有抑制增殖作用,同时有促其凋亡作用,具有抗肿瘤细胞功效.其机制之一是通过下调细胞凋亡抑制蛋白BIRC7表达,激活细胞凋亡途径关键酶Caspase-3,进而抑制A375人恶性黑色素瘤细胞细胞分化,增殖与促进凋亡.
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