2,4-二氯苯氧乙酸(除草剂)抗体是一类可以特异性结合2,4-二氯苯氧乙酸(除草剂)的多克隆抗体,主要用于体外检测2,4-二氯苯氧乙酸(除草剂)的免疫学实验. 2,4-二氯苯氧基乙酸(2,4-D)是用于控制阔叶杂草的常见内吸性除草剂.它是世界上使用最广泛的除草剂,在北美使用次数最多的是第三种.2,4-D也是重要的合成植物生长素,通常用于实验室进行植物研究,并作为植物细胞培养基(例如MS培养基)的补充.
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用于2,4-二氯苯氧乙酸对HepG2细胞葡萄糖代谢的影响及机制研究
2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)是世界上使用最广泛的除草剂之一,常被用于蔬菜作物,水果,牧场,草地,森林,水生植物等,甚至在室内尘埃,溪流以及饮用水中,也可检测到2,4-D.因此,其对生物体的影响日益受到重视.该化合物可通过食物链等进入环境和人体,并对其造成伤害.
已经报道的有细胞毒性,生殖毒性和神经毒性,但葡萄糖代谢方面的研究却很少.美国全国健康和营养调查结果显示,2,4-D能影响脂质和葡萄糖的代谢,导致脂质过氧化损伤,参与急性心肌梗死和Ⅱ型糖尿病的发病机制.本研究旨在应用体外模型,深入探讨2,4-D对肝脏葡萄糖代谢的影响及其机制.
方法:HepG2细胞用2,4-D染毒24小时后,采用糖原PAS染色,葡萄糖酶联免疫分析,改良油红O染色等方法,评价2,4-D(0,5µg/ml和50µg/ml)暴露对HepG2细胞的葡萄糖代谢和脂质代谢的影响;采用实时定量PCR方法,检测葡萄糖代谢相关基因和核受体基因的表达;采用蛋白印迹,免疫荧光方法,比较核受体未敲减和核受体敲减组的葡萄糖代谢蛋白的表达差异.
结果:和对照组相比,染毒组(5µg/ml和50µg/ml)细胞内出现了明显的糖原蓄积,未发现脂质蓄积.PCR结果显示,和对照组相比,染毒组葡萄糖代谢相关基因FoxO1,CREB,TORC2的表达明显增加,并且FoxO1和CREB的表达有统计学意义.比较核受体的表达差异,结果显示染毒组PPARβ的增加最为明显,且有统计学意义.
免疫荧光和蛋白印迹的结果显示,和对照组相比,染毒组FoxO1和CREB的表达水平也明显增加.敲减核受体PPARβ后,和对照组相比,染毒组细胞内没有出现糖原蓄积.结论:2,4-D能够影响HepG2细胞的葡萄糖代谢,并且PPARβ受体能够介导2,4-D对HepG2细胞葡萄糖代谢的影响.
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