2-(3,4二羟基苯基)-5,7-二羟基-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-3-基-BETA-D-吡喃葡糖苷酸
2-(3,4二羟基苯基)-5,7-二羟基-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-3-基-BETA-D-吡喃葡糖苷酸是一种黄酮类化合物,存在于春柴胡中,春柴胡为江苏和安徽部分地区春季采收的狭叶柴胡带根全草
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将含有特定基因的大肠杆菌的过夜培养物接种到含有适当抗生素的50mL新鲜LB培养基中.将异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)添加到混合物中,最终浓度为1mM.在18℃下再培养转化体20小时.通过离心收获细胞,并重新悬浮在含有2%葡萄糖和抗生素以及1mM异丙基β-D-1-硫代半乳糖苷的新鲜M9培养基中.将细胞密度调整为OD600值为2.在试管(14mmx145mm)中保持总反应体积2mL.在反应混合物中加入一百微摩尔的木犀草素.将混合物在25℃下孵育1.5小时.在反应混合物中添加额外的100µM木犀草素.将混合物再孵育1.5小时.在混合物中加入200µM的木犀草素以确定细胞浓度.2小时后,再向混合物中加入200µM木犀草素.将反应混合物孵育2小时.将细胞密度调整为OD600值为3.加入200µM槲皮素后反应2小时.在混合物中加入一百微摩尔的槲皮素.将混合物在30℃下振荡1.5小时,以获得2-(3,4二羟基苯基)-5,7-二羟基-4-氧代-4H-1-苯并吡喃-3-基-BETA-D-吡喃葡糖苷酸
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