传统的N-去甲基化方法,如溴化腈,氯甲酸酯参与的vonBraun反应和PolonovskI反应,往往需要剧烈的反应条件并使用有毒试剂.相比之下,酶催化去甲基化不仅反应条件温和,还能大幅减少环境污染.然而,目前已知的去甲基化酶大多针对生物大分子,如DNA,RNA和组蛋白,而针对小分子底物的去甲基化酶则较为罕见.CnsJ蛋白的发现为这一领域提供了新的研究方向.
在CommunesIns类化合物的生物合成路径中,CnsJ蛋白被认为能够催化communesInK发生C21—C22位双键的环氧化反应.为了提高其催化效率,研究人员通过定点突变技术构建了CnsJ突变体E123L和T126V.这些突变体在保留CnsJ原有功能的同时,显著提升了其去甲基化反应的转化率.例如,CnsJ催化communesInF生成communesInL的转化率为16%,而E123L和T126V突变体分别将转化率提高至36%和23%.