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环肽类化合物CP-1与CP-2的制备及其抗肾癌机制研究

环肽类化合物的制备与结构特征采用链霉菌NRRL15010菌株作为生物合成来源,通过优化发酵条件获得目标产物.初始发酵液包含0.3~0.8%D-葡萄糖作为碳源,0.3~0.6%酵母提取物提供氮源,并添加1~3%D101大孔吸附树脂用于原位吸附代谢产物.关键合成路线包括:1.25~35℃下5~7天深层发酵2.乙酸乙酯分级萃取(体积比1~3:1)3.硅胶柱层析梯度洗脱(氯仿:甲醇=100:1→1:1)4.反相硅胶柱纯化(甲醇:水=1:100→100:1)5.HPLC最终分离(ODS柱,甲醇-水系统)

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抗肿瘤活性验证

通过MTT法证实CP-1对786-O,769-P,ACHN三种肾癌细胞系的IC50值显著低于传统化疗药物.特别在72小时作用后:
CP-1对786-O的IC50降至20μM,较CP-2的40μM表现出更强的抑制效应.克隆形成实验显示,50μM浓度下CP-1/CP-2可使肾癌细胞克隆形成率归零.流式细胞术进一步揭示其将细胞周期阻滞在G1期(786-O细胞G1期比例从51.4%升至85.03%).


分子作用机制



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