通过系统的提取分离,从狼毒大戟中首次获得两个具有二苯基甲烷母核结构的化合物:
3,3'-二乙酰基-2,4'-二甲氧基-2',4,6,6'-四羟基-二苯基甲烷(化合物1)和
3,3'-二乙酰基-2,4'-二甲氧基-2',4,6,6'-四羟基-5'-甲基二苯基甲烷(月腺大戟素A,化合物2).
结构分析表明,这两个化合物均具有以下特征:
-核心为二苯基甲烷骨架
-苯环上带有乙酰基,甲氧基,羟基等取代基
-化合物2在5'位比化合物1多一个甲基取代
特别值得注意的是,甲基取代使化合物2的抗肿瘤活性显著提升,这为后续结构优化提供了重要线索.
规模化提取这两个化合物的工艺流程如下:
1.原料处理:30kg干燥狼毒大戟粉碎至40目
2.提取阶段:采用80%乙醇回流提取2次(180L/150L,各2小时)
3.浓缩纯化:提取液浓缩至8L后,依次用石油醚,乙酸乙酯,正丁醇分级萃取
4.分离精制:乙酸乙酯部分经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯梯度洗脱)
5.结晶纯化:20:1洗脱部分再经石油醚:二氯甲烷(10:1)洗脱,乙酸乙酯重结晶
该工艺在工业化生产中展现出三大优势:
-原料易得,年供应量充足
-收率稳定(化合物1得率约0.05%,化合物2约0.057%)
-可通过HPLC-ELSD联用技术实现全程质量监控