海洋红树林内生真菌发酵生产抗癌蒽醌类化合物的技术优化

发酵培养基的优化与制备

培养基是微生物生长的基质,其成分和配比直接影响目标产物的产量.经过深入研究,可开发了一种专为海洋红树林内生真菌No.1403设计的发酵培养基.该培养基的主要成分包括葡萄糖,蛋白胨,牛肉浸膏和一水硫酸锰,这些成分以特定比例溶于人工海水中,为真菌的生长和代谢提供适宜的环境.

通过多次实验优化,可确定了培养基中各组分的最佳浓度范围:
-葡萄糖:7-20g/L,优选12.36g/L;
-蛋白胨:0.5-2g/L,优选1.05g/L;
-牛肉浸膏:2-8g/L,优选6.08g/L;
-一水硫酸锰:0.1-0.5g/L,优选0.246g/L.

此外,人工海水的配方也经过优化,其成分包括氯化钠,无水硫酸钠,无水氯化钙,六水氯化镁,硼酸,溴化钾和碳酸氢钠.将培养基成分溶于10-60%浓度的人工海水中,进一步提高了1403C的产量.

发酵工艺的改进

在优化培养基的基础上,可还改进了发酵工艺.具体步骤如下:
1.从新鲜固体平板中挖取4块3×3mm的琼脂块,接种至种子培养基中,于28℃,170r/mIn的条件下发酵培养2-3天,获得新鲜种子液.
2.将新鲜种子液按3-10%的接种量接入优化后的发酵培养基中,继续在28℃,170r/mIn的条件下发酵培养4-7天.
3.待发酵液pH接近7.0或颜色变为红黑色时,停止发酵,分离蒽醌类化合物1403C.

实验结果表明,采用这种新型培养基和发酵工艺,1403C的产量从原来的600-800mg/L提高到2298mg/L,显著提高了生产效率.