该化合物的提取采用阶梯式溶剂萃取结合层析纯化技术:
1.以75%乙醇热回流提取干燥川楝子粉末,经石油醚-乙酸乙酯-正丁醇三相萃取
2.乙酸乙酯相通过AB-8型大孔树脂进行初级纯化,采用15%-70%乙醇梯度洗脱
3.正相硅胶柱层析使用二氯甲烷-甲醇(80:1至1:1)多级梯度分离
4.最终经反相C18柱以70%甲醇水溶液等度洗脱获得纯度>98%的目标产物
体外实验表明:
2mmol/L浓度处理48小时可使U251细胞凋亡率达27.5%±5.5%
通过AnnexInV-FITC/PI双染证实其诱导细胞凋亡的作用呈剂量依赖性
Hoechst染色显示典型核固缩和凋亡小体形成
Westernblot分析揭示其通过下调NF-κB信号通路抑制肿瘤细胞增殖,这为开发神经胶质瘤靶向药物提供了明确依据.