本文涉及的吡啶骈环类化合物具有通式Ⅰ所示的结构,其中环A为苯环或含有1~3个杂原子(N,O,S)的五元或六元杂芳环.这些化合物通过一系列合成步骤制备,主要包括选择性酯化,酰氯还原,MItsunobu反应,关环反应等.合成过程中使用的原料如吡啶-2,3-二甲酸酐,二氯亚砜,硼氢化钠等均可从商业渠道获得.
合成路线的关键步骤包括:
将吡啶-2,3-二甲酸酐与异丙醇反应,生成吡啶-2,3-二甲酸异丙酯.
通过酰氯还原生成3-羟基甲基-吡啶-2-甲酸异丙酯.
利用MItsunobu反应引入甘氨酸甲酯,生成3-((N-甲氧羰基甲基-N-(甲苯-4-磺酰基)-氨基)-甲基)-吡啶-2-羧酸异丙酯.
在甲醇钠条件下关环,生成1,6-二氮杂萘-7-甲酸甲酯.
通过一系列生物学活性测试,评估了这些化合物对HIV-1整合酶的抑制活性.测试内容包括:
整合酶二聚化抑制活性测试:通过AlphaScreen技术,评估化合物对整合酶二聚化的抑制作用.
整合酶-LEDGF/p75结合抑制活性测试:同样使用AlphaScreen技术,检测化合物对整合酶与LEDGF/p75结合的抑制效果.
3'-加工和链转移抑制活性测试:通过放射性标记的核苷酸底物,评估化合物对整合酶催化3'-加工和链转移过程的抑制活性.
测试结果显示,部分化合物对整合酶的多重位点和多个催化过程表现出显著的抑制活性.例如,化合物LZ-35对整合酶二聚化和IN-LEDGF/p75结合过程的抑制活性分别为0.27μM和0.09μM.化合物NLH-29对3'-加工和链转移过程的抑制活性分别为2μM和0.4μM,其抗病毒活性与对照化合物L-870,810相当,甚至在3'-加工抑制活性上更优.