PhomopsInolA是通过加入表观遗传修饰剂丁酸钠对天门冬拟茎点霉进行表观遗传调控,分离得到的一种具有免疫抑制活性的色酮类化合物.具体制备方法如下:
步骤1:将天门冬拟茎点霉菌PhomopsIsasparagI发酵获得的菌丝体采用乙酸乙酯浸提,重复3次,每次72h,浓缩并合并提取物,得到粗提物.
步骤2:将粗提物在硅胶柱色谱上进行色谱分离,使用CH2Cl2-甲醇二元系统进行梯度洗脱,得到Fr.1-Fr.9组分.
步骤3:将组分Fr.6置于硅胶CC采用体积比为2:1的CH2Cl2-乙酸乙酯洗脱液等度洗脱,得到Fr.6.1-Fr.6.6组分.
步骤4:将组分Fr.6.3置于葡聚糖凝胶SephadexLH-20CC采用体积比为1:1的甲醇-CH2Cl2纯化得到PhomopsInolA.
PhomopsInolA在制备免疫抑制剂中的应用广泛,具体包括以下几个方面:
1.抑制钙调磷酸酶活力:PhomopsInolA可作为以钙调磷酸酶为靶点的免疫抑制剂,通过直接降低钙调磷酸酶活性发挥免疫抑制作用.
2.抑制细胞内NFAT蛋白表达:PhomopsInolA能够抑制细胞内NFAT蛋白的表达,从而抑制CN/NFAT信号通路.
3.降低IL-2的mRNA转录水平:PhomopsInolA能够降低细胞中IL-2的mRNA转录水平,从而抑制免疫反应.
4.抑制T淋巴细胞和B淋巴细胞增值:PhomopsInolA对T淋巴细胞和B淋巴细胞的增值具有显著的抑制作用.
5.抑制淋巴细胞中CD4+分子的表达:PhomopsInolA能够抑制淋巴细胞中CD4+分子的表达,从而发挥免疫抑制作用.