现有的莱鲍迪苷M合成方法主要依赖于化学合成或酶法催化.化学合成方法通常涉及复杂的反应步骤和昂贵的化学试剂,不仅成本高,还可能对环境造成负面影响.而酶法催化虽然较为环保,但其底物莱鲍迪苷A和莱鲍迪苷D的成本较高,限制了其大规模应用.因此,寻找一种原料成本低廉,工艺步骤简单的合成方法成为行业研究的重点.
本文提出了一种基于生物酶催化的莱鲍迪苷M合成新路线.首先,利用糖基转移酶UGTSL2催化甜菊甙合成中间产物莱鲍迪苷E;随后,通过糖基转移酶UGT76G1进一步催化莱鲍迪苷E合成莱鲍迪苷M.该技术路线采用分子克隆技术,构建了能够异源表达UDP-糖基转移酶和蔗糖合成酶的大肠杆菌基因工程菌,通过自诱导发酵产酶,直接以细胞粗提液进行催化反应,无需额外添加UDP-葡萄糖和UDP,从而大大降低了合成成本.