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铜绿假单胞菌ZJPH1504在生物催化合成西他列汀手性中间体中的应用

铜绿假单胞菌ZJPH1504的筛选与鉴定铜绿假单胞菌ZJPH1504是从浙江工业大学校园内采集的土样中分离得到的一株新菌株.该菌株经过富集培养,平板初筛,菌株纯化,液体培养,活性复筛等多个步骤,最终通过TLC和HPLC检测确认其具有高效催化4-氧-4-[3-(三氟甲基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7-(8H)-基]-1-(2,4,5-三氟苯基)丁-2-酮(S)-3-羟基-1-[3-(三氟甲基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7-(8H)-基]-4-(2,4,5-三氟苯基)丁-1-酮的能力.菌株的形态学特征,生理生化特性以及16SrDNA序列分析进一步证实其属于铜绿假单胞菌属.
📌 参考资料/链接:
Catalysts, 2025, 15(9), 845.

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生物催化反应体系优化

在生物催化反应中,铜绿假单胞菌ZJPH1504的全细胞被用作酶源,催化底物不对称还原生成(S)-3-羟基-1-[3-(三氟甲基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7-(8H)-基]-4-(2,4,5-三氟苯基)丁-1-酮.反应体系由pH6~9的缓冲液,底物,辅助底物(如甘油,葡萄糖等)以及湿菌体组成.通过优化反应温度,pH值,底物浓度和辅助底物类型,发现反应在40~45℃,pH7.5,底物浓度9g/L,甘油60g/L的条件下,产率和e.e.值均达到最佳,分别为60.2%和>99.9%.


有机溶剂和离子液体对催化效率的影响

为了提高催化效率,研究还探讨了有机溶剂和离子液体对反应的影响.结果显示,邻苯二甲酸二丁酯作为有机溶剂时,可将产率提高至75.6%,并且将反应时间缩短至24h.此外,添加[氯化胆碱]+[甘氨酸]-类离子液体,反应产率可进一步提升至70.1%.这些结果表明,有机溶剂和离子液体在改善底物溶解性和促进酶催化效率方面具有重要作用.



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