季也蒙毕赤酵母(MeyerozymaguIllIermondII)SC1103是一种高效催化HMF选择性还原合成DHMF的微生物.与传统的化学催化剂相比,这种酵母具有以下优势:
1.高选择性和高效性:该酵母在催化HMF还原时,产率可达95%以上,且选择性高达99%,显著优于化学催化方法.
2.反应条件温和:生物催化反应通常在常温和中性pH条件下进行,无需高温高压,避免了HMF的副反应,提高了产物纯度.
3.环境友好:该酵母催化剂无需使用有毒试剂或昂贵的金属催化剂,同时可通过简单的离心回收和重复利用,降低了生产成本和环境污染.
4.高底物耐受性:季也蒙毕赤酵母能够耐受高浓度的HMF(最高可达200mM),克服了传统微生物对HMF抑制敏感的问题.
季也蒙毕赤酵母催化HMF还原合成DHMF的工艺包括以下步骤:
1.酵母活化与培养:将季也蒙毕赤酵母接种于YPD液体培养基中,在30℃,200r/mIn条件下活化12小时,随后按2%的接种量接入新鲜培养基中培养12小时,收集菌体细胞.
2.催化反应:将菌体细胞加入含有HMF和葡萄糖的缓冲液中,调节pH为4.0~10.0,在10~40℃,200r/mIn条件下反应.反应过程中,通过液相色谱实时监控HMF和DHMF的浓度变化.
3.底物分批流加:为提高DHMF的积累浓度,采用底物分批流加策略.当HMF浓度降低至一定水平时,依次补加HMF和葡萄糖,最终可使DHMF浓度达到190mM以上,总产率达95%.