专利申请CN103214568公开一种固相制备促胰液素的方法,包括以下步骤:1)选择合适的固相载体;2)按照固相合成方法,逐个偶联氨基酸;3)裂解,得到粗肽;4)粗肽经纯化得到Secretin.步骤1)中所述的固相载体为RinkAmide树脂,RinkAmide-AM树脂或RinkAmide-MBHA树脂等氨基树脂,树脂替代度为0.1-0.6mmol/g,优选0.1-0.4,更优选0.15-0.25.其中,所述步骤2)依促胰液素肽序从Val端逐个偶联氨基酸的进一步详述是指,首先,Fm℃-Val-OH与树脂在偶联剂下偶联得到Fm℃-Val-树脂,在脱保护溶剂下脱除Fm℃;与Fm℃-Leu-OH在偶联剂作用下偶联得到Fm℃-Leu-Val-树脂,在脱保护溶剂下脱除Fm℃;与Fm℃-Gly-OH在偶联剂作用下偶联得到Fm℃-Gly-Leu-Val-树脂,在脱保护溶剂下脱除Fm℃;与Fm℃-Gln-OH在偶联剂作用下偶联得到Fm℃-Gln-Gly-Leu-Val-树脂;然后,按照上述方法及下列氨基酸顺序依次偶联:(1)Fm℃-Leu-OH,Fm℃-Leu-OH,Fm℃-Arg(pbf)-OH,Fm℃-Gln-OH,Fm℃-Leu-OH,Fm℃-Arg(pbf)-OH,Fm℃-Ala-OH,Fm℃-Ser(tBu)-OH,Fm℃-Asp(OtBu)-OH,Fm℃-Arg(pbf)-OH,Fm℃-Leu-OH,Fm℃-Arg(pbf)-OH,Fm℃-Ser(tBu)-OH,Fm℃-Leu-OH,Fm℃-Glu(OtBu)-Ser[psi(Me,Me)Pro]-OH,Fm℃-Thr(tBu)-OH,Fm℃-Phe-OH,Fm℃-Thr(tBu)-OH,Fm℃-Gly-OH,Fm℃-Asp(OtBu)-OH,Fm℃-Ser(tBu)-OH,Fm℃-His(Trt)-OH;或者(2)Fm℃-Leu-OH,Fm℃-Leu-OH,Fm℃-Arg(pbf)-OH,Fm℃-Gln-OH,Fm℃-Leu-OH,Fm℃-Arg(pbf)-OH,Fm℃-Ala-Ser[psi(Me,Me)Pro]-OH,Fm℃-Asp(OtBu)-OH,Fm℃-Arg(pbf)-OH,Fm℃-Leu-OH,Fm℃-Arg(pbf)-OH,Fm℃-Ser(tBu)-OH,Fm℃-Leu-OH,Fm℃-Glu(OtBu)-Ser[psi(Me,Me)Pro]-OH(即(GAMMAS,4S)-4-羧基-GAMMA-[[芴甲氧羰基]氨基]-2,2-二甲基-DELTA-氧代-3-恶唑烷戊酸叔丁酯),Fm℃-Thr(tBu)-OH,Fm℃-Phe-OH,Fm℃-Thr(tBu)-OH,Fm℃-Gly-OH,Fm℃-Asp(OtBu)-OH,Fm℃-Ser(tBu)-OH,Fm℃-His(Trt)-OH.
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